| 犬瘟热病毒反转录—聚合酶链反应检测方法的建立及初步应用 |
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| 引用本文： | 乔军,孟庆龄,夏咸柱,何宏彬.犬瘟热病毒反转录—聚合酶链反应检测方法的建立及初步应用[J].西北农业学报,2001,10(1):51-54,66. |
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| 作者姓名： | 乔军 孟庆龄 夏咸柱 何宏彬 |
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| 作者单位： | 1. 塔里木农垦大学动科院,
2. 解放军军需大学军事兽医研究所,
3. 东北农业大学生命科学院, |
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| 摘 要： | 根据 Gen Bank中 Barrett报道的犬瘟热病毒弱毒株 Onderstepoort的血凝蛋白基因序列 ,设计合成了一对能扩增 76 0 bp基因片段的引物。用异硫氰酸胍 -酚 -仿一步抽提法提取细胞总 RNA进行反转录 ,再以此产物为模板进行 PCR扩增 ,筛选出最佳扩增条件。结果以此对引物进行 PCR扩增能得到与设计片段大小相同的产物 ,并且不扩增犬细小病毒、犬 I型腺病毒、犬冠状病毒、狂犬病病毒的核酸。敏感性试验证实 ,此法能扩增出稀释 1 0 0 0倍的 CDV强毒细胞培养物 ( 1 0 5 .1 TCID5 0 /0 .1 ml)的反转录产物 ,其敏感性远高于电镜负染和荧光抗体染色法。经初步应用表明 ,此法可用于犬瘟热的临床诊断和实验研究。
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| 关 键 词： | 犬瘟热病毒 反转录—聚合酶链反应 |
| 文章编号： | 1004-1389(2001)01-0051-04 |
| 收稿时间： | 2000/11/28 0:00:00 |
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