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10种绣线菊DNA的提取及RAPD反应体系的优化
作者姓名:房慧旺  刘庆华  王奎玲  刘庆超  唐启和
作者单位:房慧旺(青岛农业大学环境艺术学院,青岛,266109);刘庆华(青岛农业大学环境艺术学院,青岛,266109);王奎玲(青岛农业大学环境艺术学院,青岛,266109);刘庆超(青岛农业大学环境艺术学院,青岛,266109);唐启和(青岛农业大学环境艺术学院,青岛,266109)
基金项目:山东省农业良种工程重大项目
摘    要:旨在筛选出绣线菊属 RAPD 反应的最佳体系,为绣线菊属植物种质资源遗传多样性和亲缘关系的研究奠定基础.试验以 10 种绣线菊属植物为材料,采用改良 CTAB 法进行冬芽和嫩叶的总 DNA 提取并对影响 RAPD 扩增效果的因素进行优化.通过单因素优化筛选出最佳的 20μl 反应体系10×Taq buffer 2μl,Taq 酶 1.0U,0.15mmol/L dNTP,DNA 2ng/μl,引物 0.21μ mol/L,Mg2 2.0mmol/L;反应程序94℃预变性 4min,然后进行 40 个循环94℃变性 45s,37℃退火 1min,72℃延伸 1min.最后72℃延伸5min,4℃终止反应.结果发现,采用改良 CTAB 法所提取绣线菊冬芽的 DNA 达到 RAPD 反应的要求.筛选体系扩增出清晰稳定的多态性条带,可用于对绣线菊属遗传育种方面的研究.

关 键 词:绣线菊属  DNA提取  RAPD  绣线菊  提取  RAPD  反应体系  优化筛选  System  Reaction  Establishment  DNA  Extraction  遗传育种  多态性  稳定  筛选体系  发现  结果  延伸  退火  循环  预变性  程序

Studies on DNA Extraction and Establishment of RAPD Reaction System in Spiraea L.
Authors:Fang Huiwang  Liu Qinghu  Wang Kuiling  Liu Qingchao  Tang Qihe
Abstract:
Keywords:Spiraea  DNA extraction  RAPD
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