10种绣线菊DNA的提取及RAPD反应体系的优化 |
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作者姓名: | 房慧旺 刘庆华 王奎玲 刘庆超 唐启和 |
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作者单位: | 房慧旺(青岛农业大学环境艺术学院,青岛,266109);刘庆华(青岛农业大学环境艺术学院,青岛,266109);王奎玲(青岛农业大学环境艺术学院,青岛,266109);刘庆超(青岛农业大学环境艺术学院,青岛,266109);唐启和(青岛农业大学环境艺术学院,青岛,266109) |
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基金项目: | 山东省农业良种工程重大项目 |
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摘 要: | 旨在筛选出绣线菊属 RAPD 反应的最佳体系,为绣线菊属植物种质资源遗传多样性和亲缘关系的研究奠定基础.试验以 10 种绣线菊属植物为材料,采用改良 CTAB 法进行冬芽和嫩叶的总 DNA 提取并对影响 RAPD 扩增效果的因素进行优化.通过单因素优化筛选出最佳的 20μl 反应体系10×Taq buffer 2μl,Taq 酶 1.0U,0.15mmol/L dNTP,DNA 2ng/μl,引物 0.21μ mol/L,Mg2 2.0mmol/L;反应程序94℃预变性 4min,然后进行 40 个循环94℃变性 45s,37℃退火 1min,72℃延伸 1min.最后72℃延伸5min,4℃终止反应.结果发现,采用改良 CTAB 法所提取绣线菊冬芽的 DNA 达到 RAPD 反应的要求.筛选体系扩增出清晰稳定的多态性条带,可用于对绣线菊属遗传育种方面的研究.
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关 键 词: | 绣线菊属 DNA提取 RAPD 绣线菊 提取 RAPD 反应体系 优化筛选 System Reaction Establishment DNA Extraction 遗传育种 多态性 稳定 筛选体系 发现 结果 延伸 退火 循环 预变性 程序 |
Studies on DNA Extraction and Establishment of RAPD Reaction System in Spiraea L. |
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Authors: | Fang Huiwang Liu Qinghu Wang Kuiling Liu Qingchao Tang Qihe |
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Abstract: | |
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Keywords: | Spiraea DNA extraction RAPD |
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