| 猪miR-124靶向IQGAP2调节巨噬细胞内沙门氏菌的增殖 |
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| 引用本文： | 陈旺,邓榆,殷俊,官州,金凯,石博妹,黄廷华,姚敏.猪miR-124靶向IQGAP2调节巨噬细胞内沙门氏菌的增殖[J].南方农业学报,2020,51(12):3066-3072. |
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| 作者姓名： | 陈旺 邓榆 殷俊 官州 金凯 石博妹 黄廷华 姚敏 |
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| 作者单位： | 长江大学动物科学学院,湖北荆州 434025 |
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| 基金项目： | 长江大学大学生创新创业计划项目国家自然科学基金项目 |
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| 摘 要： | 目的]明确猪miR-124与其靶基因IQGAP2间的表达调控关系,以及miR-124表达水平与猪巨噬细胞内沙门氏菌数量的关联,为揭示沙门氏菌在感染细胞内存活与增殖的机制提供理论依据.方法]通过荧光素酶报告基因系统验证miR-124与IQGAP2基因的作用位点;再以GM-CSF诱导的猪巨噬细胞和鼠伤寒沙门氏菌(ATCC 14028)为试验材料,通过实时荧光定量PCR和流式细胞术测定沙门氏菌感染猪巨噬细胞中miR-124和IQGAP2基因的表达及巨噬细胞内沙门氏菌的增殖情况.结果]miR-124结合位点野生型载体转染的荧光报告信号显著低于miR-124结合位点突变载体(P<0.05,下同),但共转染anti-miR-124序列后能显著增强miR-124结合位点野生型载体的荧光报告信号.经沙门氏菌感染后,猪巨噬细胞中的miR-124表达被激活,感染12、24和48 h后的相对表达量均显著高于沙门氏菌感染前(0 h),而IQGAP2基因表达水平呈显著下调趋势;在沙门氏菌感染猪巨噬细胞内,miR-124表达水平与IQGAP2基因表达水平呈明显负相关(r=-0.92).miR-124高表达组细胞内的沙门氏菌数量显著高于正常巨噬细胞,但miR-124敲低表达组细胞内的沙门氏菌数量显著低于正常巨噬细胞;IQGAP2基因敲低表达组细胞内的沙门氏菌数量显著高于正常巨噬细胞;此外,miR-124高表达+IQGAP2基因敲低表达组细胞内的沙门氏菌数量与IQGAP2基因敲低表达处理组相比无显著差异(P>0.05),但显著高于miR-124高表达组细胞.结论]沙门氏菌感染猪巨噬细胞中的miR-124表达水平与IQGAP2基因表达水平及胞内沙门氏菌数量呈负相关,即沙门氏菌可通过上调miR-124表达靶向抑制IQGAP2基因表达,从而调节其在猪巨噬细胞内的增殖.
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| 关 键 词： | 猪沙门氏菌 miR-124 IQGAP2基因 胞内增殖 流式细胞术 荧光素酶报告基因系统 |
Porcine miR-124 target IQGAP2 and regulating intracellular Salmonella proliferation in macrophage cells |
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| CHEN Wang,DENG Yu,YIN Jun,GUAN Zhou,JIN Kai,SHI Bo-mei,HUANG Ting-hua,YAO Min.Porcine miR-124 target IQGAP2 and regulating intracellular Salmonella proliferation in macrophage cells[J].Journal of Southern Agriculture,2020,51(12):3066-3072. |
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| Authors: | CHEN Wang DENG Yu YIN Jun GUAN Zhou JIN Kai SHI Bo-mei HUANG Ting-hua YAO Min |
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