| A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的原核表达、纯化及鉴定 |
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| 引用本文： | 颜健华,何奇松,蒋家霞,冯淑萍,黄胜斌,韦达有,易春华,许瑞胜,梁晟.A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的原核表达、纯化及鉴定[J].南方农业学报,2016(2):301-305. |
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| 作者姓名： | 颜健华 何奇松 蒋家霞 冯淑萍 黄胜斌 韦达有 易春华 许瑞胜 梁晟 |
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| 作者单位： | 1. 广西动物疫病预防控制中心,南宁,530001;2. 桂林市动物疫病预防控制中心,广西桂林,541002;3. 崇左市动物疫病预防控制中心,广西崇左,532200 |
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| 基金项目： | 广西科学研究与技术开发计划项目(桂科攻0779001) |
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| 摘 要： | 【目的】通过原核表达及纯化获得A型口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白VP1,为建立A型FMDV的ELISA诊断方法及开发安全、高效、广谱的新型基因工程疫苗提供技术支持。【方法】以含A型FMDV VP1基因的重组质粒p MD18-T-A-VP1为模板,通过特异性引物扩增A型FMDV的VP1基因,构建表达质粒p ET-32a-VP1和p GEX-6p-1-VP1,然后转入感受态细胞E.coli BL21(DE3)中诱导表达融合蛋白。【结果】诱导表达获得的VP1融合蛋白主要以包涵体形式存在,分别经His·Bind和GST·Bind柱层析纯化,SDS-PAGE分析结果表明融合蛋白纯度较高;Western blotting检测分析发现,VP1融合蛋白能与豚鼠抗A型FMDV阳性血清发生特异性结合,但不与豚鼠抗O型和Asia1型FMDV阳性血清反应。【结论】经原核表达及纯化获得的A型FMDV VP1融合蛋白具有良好的特异性和抗原性,可用于易感动物的免疫及血清抗体筛查。
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| 关 键 词： | A型FMDV VP1蛋白 原核表达 纯化 鉴定 |
Prokaryotic expression,purification and identification of structural protein VP1 of foot-and-mouth disease virus serotype A |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | foot-and-mouth disease virus (FMDV) serotype A VP1 protein prokaryotic expression purification identification |
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