| 鸡传染性贫血病毒衣壳蛋白的原核表达及鉴定 |
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| 引用本文： | 余树培,夏文龙,胡成,吴海涛,吴萌,赵方,成大荣.鸡传染性贫血病毒衣壳蛋白的原核表达及鉴定[J].安徽农业科学,2015(28):118-121. |
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| 作者姓名： | 余树培 夏文龙 胡成 吴海涛 吴萌 赵方 成大荣 |
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| 作者单位： | 扬州大学兽医学院,江苏扬州225009;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州225009 |
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| 基金项目： | 江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目，江苏省高校优势学科建设工程项目 |
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| 摘 要： | 目的]用大肠杆菌表达出CIAV的衣壳蛋白(VP1)作为免疫抗原,以建立鸡传染性贫血病毒(CIAV)的血清学诊断方法.方法]根据已发表的CIAV的衣壳蛋白(VP1)序列,结合Protean软件预测出抗原富集区域,设计并合成1对引物,利用PCR扩增该区域基因,将扩增成功的VP1基因片段经T4连接酶连接至PGEX-6P-1表达载体.连接成功的重组质粒转化不同的大肠杆菌表达菌株,通过IPTG诱导进行原核表达,筛选出表达量最高的菌株及最佳诱导时间和1PTG诱导浓度.以感染CIAV的鸡阳性血清为一抗,对重组蛋白GST-VP1进行Western-blot分析.结果]成功获得了重组质粒PGEX-VP1,诱导表达后经SDS-PAGE和Western-blot分析,分子量约71kD的融合蛋白GST-VP1在大肠杆菌Rosseta中以包涵体形式大量表达,并能与鸡传染性贫血病毒阳性血清发生反应.结论]该研究可为抗CIAV单克隆抗体的制备及血清学诊断方法的建立等研究奠定基础.
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| 关 键 词： | 鸡传染性贫血病毒 VP1蛋白 原核表达 |
Prokaryotic Expression and Identification of Capsid Protein of Chicken Infectious Anemia Virus |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Chicken infectious anemia virus VPI protein Prokaryotic expression |
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