| 新加坡石斑鱼虹彩病毒ORF086蛋白的原核表达、纯化及抗体制备 |
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| 引用本文： | 夏立群,张红莲,梁海鹰,刘森林.新加坡石斑鱼虹彩病毒ORF086蛋白的原核表达、纯化及抗体制备[J].上海海洋大学学报,2010(1). |
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| 作者姓名： | 夏立群 张红莲 梁海鹰 刘森林 |
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| 作者单位： | 广东海洋大学水产学院;中山大学生命科学学院;广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室; |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金(06104920) |
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| 摘 要： | 新加坡石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)是导致石斑鱼养殖严重经济损失的主要病原体。本研究构建了含有新加坡石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)ORF086基因的重组表达质粒载体pET32a-ORF086,将其转化到大肠杆菌中进行融合表达,经SDS-PAGE分析和Western blot鉴定,证实重组大肠杆菌融合表达了SGIV ORF086蛋白。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isoprophl-thio-β-D-galactopyranoside,IPTG)浓度、诱导温度、诱导时间等诱导表达条件的优化,确定在0.7 mmol/L IPTG、16℃诱导14 h时可溶性SGIV ORF086重组蛋白占重组蛋白的60%。经镍琼脂糖凝胶柱纯化重组蛋白,纯化度达95%以上。用纯化的SGIV ORF086蛋白免疫小鼠,获得了高效特异的SGIV ORF086抗血清。
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| 关 键 词： | 新加坡石斑鱼虹彩病毒 原核表达 多克隆抗体 SGIV ORF086重组蛋白 |
Prokaryotic expression,purification and antibody preparation of SGIV ORF086 protein |
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| XIA Li-qun,ZHANG Hong-lian,LIANG Hai-ying,LIU Sen-lin.Prokaryotic expression,purification and antibody preparation of SGIV ORF086 protein[J].Journal of Shanghai Ocean University,2010(1). |
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| Authors: | XIA Li-qun ZHANG Hong-lian LIANG Hai-ying LIU Sen-lin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Singapore grouper iridovirus(SGIV) prokaryotic expression polyclonal antibody SGIV ORF086 recombinant protein |
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