| 产单核细胞李斯特菌溶血素O单克隆抗体的制备与鉴定 |
| |
| 引用本文： | 孔德壮,张衍海,龚振华.产单核细胞李斯特菌溶血素O单克隆抗体的制备与鉴定[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2010,38(7):39-43. |
| |
| 作者姓名： | 孔德壮 张衍海 龚振华 |
| |
| 作者单位： | 西北农林科技大学 动物医学院;中国动物卫生与流行病学中心;中国动物卫生与流行病学中心 |
| |
| 基金项目： | 公益性行业（农业）科研专项经费项目（200903055） |
| |
| 摘 要： | 【目的】制备抗产单核细胞李斯特菌溶血素O(LLO)的特异性单克隆抗体。【方法】用LLO重折叠的原核表达产物LLO-his免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞,与骨髓瘤细胞在PEG4000作用下融合,经间接ELISA法筛选、多克隆及单克隆分离出阳性细胞株后,再用体内诱生腹水法大量制备单克隆抗体。用辛酸-硫酸铵沉淀法纯化单克隆抗体,间接ELISA法测定其效价及相对亲和常数;用HBT单克隆抗体亚类鉴定试剂盒鉴定抗体亚型;常规方法制备染色体,观察细胞株染色体数目及标志染色体;Western blot检测抗体的特异性。【结果】获得了2株稳定分泌抗LLO单克隆抗体的杂交瘤细胞系,分别命名为3F5-G3和2B4-C8,其腹水效价分别为1∶(1×105)和1∶(1×107);染色体分别为97±5和93±8条,且观察到标志染色体;相对亲和常数分别为0.49和0.26μg/mL;抗体亚类均为IgG1,轻链均为κ链。特异性鉴定结果表明,2种单克隆抗体均可与LLO蛋白发生特异性反应,而与载体蛋白不发生反应。【结论】获得了抗LLO的特异性单克隆抗体。
|
| 关 键 词： | 产单核细胞李斯特菌 李斯特菌溶血素O 单克隆抗体 |
| 收稿时间： | 2009/12/29 0:00:00 |
Preparation and identification of monoclonal antibodies against Listeriolysin O |
| |
| KONG De-zhuang,ZHANG Yan-hai,GONG Zhen-hua,LI Wei,ZHENG Zeng-ren,LI Yu-qing,ZHANG Yan-ming.Preparation and identification of monoclonal antibodies against Listeriolysin O[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2010,38(7):39-43. |
| |
| Authors: | KONG De-zhuang ZHANG Yan-hai GONG Zhen-hua LI Wei ZHENG Zeng-ren LI Yu-qing ZHANG Yan-ming |
| |
| Institution: | 1(1 College of Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China;2 China Animal Health and Epidemiology Center,Qingdao,Shandong266032,China) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Listeria monocytogenes Listeriolysin O monoclonal antibody |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《西北农林科技大学学报(社会科学版)》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《西北农林科技大学学报(社会科学版)》下载免费的PDF全文 |
|
