| 叶锈菌侵染诱导产生的小麦Wrab17蛋白的原核表达、纯化及其抗体制备 |
| |
| 引用本文： | 杨高山,王帅帅,张恒,韩胜芳,王冬梅.叶锈菌侵染诱导产生的小麦Wrab17蛋白的原核表达、纯化及其抗体制备[J].河北农业大学学报,2015,38(2). |
| |
| 作者姓名： | 杨高山 王帅帅 张恒 韩胜芳 王冬梅 |
| |
| 作者单位： | 河北农业大学生命科学学院,河北保定,071001 |
| |
| 摘 要： | 叶锈菌(Puccinia triticina)引起的小麦叶锈病是影响世界小麦生产的重要病害之一。研究小麦抗叶锈相关防卫蛋白的表达,对于深入研究小麦对叶锈菌的抗病机制,更好地为农业生产服务,具有重要意义。Wrab17(Wheat response to ABA)是一个冷胁迫诱导蛋白,前期工作通过构建叶锈菌侵染早期的小麦SSH文库及ESTs序列分析,筛选到Wrab17基因在不亲和组合接种后早期显著上调表达,初步表明Wrab17基因可能参与了小麦抗叶锈菌侵染过程,这是首次发现Wrab17参与抗病反应。本研究进一步利用RT-PCR技术从接种叶锈菌的小麦叶片中克隆获得了Wrab17基因的CDS区,构建了Wrab17蛋白原核表达载体,并在大肠杆菌中高效表达Wrab17蛋白。利用镍柱亲和层析方法获得了纯度较高的重组蛋白,将融合蛋白纯化后制备其兔抗血清,得到特异性较好的多克隆抗体。为进一步通过Western Blotting技术检测Wrab17在小麦被叶锈菌侵染后不同时间点表达量的变化,明确Wrab17参与小麦抵抗叶锈菌侵染的防卫反应奠定基础。
|
| 关 键 词： | 叶锈菌 Wrab17基因 原核表达 诱导表达 蛋白纯化 |
Prokaryotic expression,protein purification and antiserum preparation of wheat Wrab17 induced by leaf rust |
| |
| YANG Gao-shan,WANG Shuai-shuai,ZHANG Heng,HAN Sheng-fang,WANG Dong-mei.Prokaryotic expression,protein purification and antiserum preparation of wheat Wrab17 induced by leaf rust[J].Journal of Agricultural University of Hebei,2015,38(2). |
| |
| Authors: | YANG Gao-shan WANG Shuai-shuai ZHANG Heng HAN Sheng-fang WANG Dong-mei |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | wheat leaf rust Wrab17 gene prokaryotic expression induced expression protein purification |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
