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小鼠IL-1β原核表达及其与在布鲁氏杆菌侵染巨噬细胞中差异表达的初步研究
引用本文:杨馨,邹德颖,张凯,常江,常恒祯,战俊澎,郭珣,刘益辛,程梦妍,韩成,胡盼,卢士英,李岩松,柳增善,任洪林.小鼠IL-1β原核表达及其与在布鲁氏杆菌侵染巨噬细胞中差异表达的初步研究[J].湖北农业科学,2022,61(6):112-116+121.
作者姓名:杨馨  邹德颖  张凯  常江  常恒祯  战俊澎  郭珣  刘益辛  程梦妍  韩成  胡盼  卢士英  李岩松  柳增善  任洪林
作者单位:吉林大学人兽共患病研究教育部重点实验室/人兽共患病研究所/动物医学学院,长春 130062
基金项目:吉林省科技发展计划资助项目(20200402059NC);;中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(45121031B007);
摘    要:为研究IL-1β在布鲁氏杆菌(Brucella)侵染小鼠巨噬细胞过程中的表达情况,首先构建重组小鼠IL-1β原核稳定表达系统,免疫新西兰兔获得多克隆抗体,通过ELISA检测血清效价,并通过Western blot分析其活性,再以感染复数(multiplicity of infection,MOI)为1∶100(细菌∶细胞)建立猪种布鲁氏杆菌S2株侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7的模型,利用RT-PCR检测细菌侵染过程中IL-1β和MyD88 mRNA的变化水平;Western blot分析IL-1β在蛋白水平的变化。结果表明,重组蛋白IL-1β分子质量31 ku,多克隆抗体效价为1∶256 000,并且具有良好的特异性;与对照组相比,感染后IL-1β mRNA和IL-1β蛋白表达上调,胞内细菌数减少。猪种布鲁氏杆菌S2株侵染巨噬细胞IL-1β的表达量随时间变化并影响胞内活菌数。

关 键 词:布鲁氏杆菌(Brucella)  原核表达  多克隆抗体  IL-1β  MyD88

Prokaryotic expression of mouse IL-1β and preliminary study on its differential expression in Brucella infection
YANG Xin,ZOU De-ying,ZHANG Kai,CHANG Jiang,CHANG Heng-zhen,ZHAN Jun-peng,GUO Xun,LIU Yi-xin,CHENG Meng-yan,HAN Cheng,HU Pan,LU Shi-ying,LI Yan-song,LIU Zeng-shan,REN Hong-lin.Prokaryotic expression of mouse IL-1β and preliminary study on its differential expression in Brucella infection[J].Hubei Agricultural Sciences,2022,61(6):112-116+121.
Authors:YANG Xin  ZOU De-ying  ZHANG Kai  CHANG Jiang  CHANG Heng-zhen  ZHAN Jun-peng  GUO Xun  LIU Yi-xin  CHENG Meng-yan  HAN Cheng  HU Pan  LU Shi-ying  LI Yan-song  LIU Zeng-shan  REN Hong-lin
Abstract:
Keywords:
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