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甘薯响应蔓割病病原菌侵染的IbWRKY7基因克隆与表达分析
引用本文:刘意,刘泓江,陈培茹,杨新笋,雷剑,王连军,柴沙沙,靳晓杰,杨圆圆,程贤亮,焦春海,张文英.甘薯响应蔓割病病原菌侵染的IbWRKY7基因克隆与表达分析[J].中国农业大学学报,2022,27(6):91-99.
作者姓名:刘意  刘泓江  陈培茹  杨新笋  雷剑  王连军  柴沙沙  靳晓杰  杨圆圆  程贤亮  焦春海  张文英
作者单位:长江大学 农学院, 湖北 荆州 434025; 湖北省农业科学院 粮食作物研究所, 武汉 430064
基金项目:国家重点研发计划(2019YFD1001300,2019YFD1001305);粮食作物种质创新与遗传改良湖北省重点实验室开放课题;国家现代甘薯产业技术体系(CARS-11-C-15);湖北省农业科学院特色学科、湖北省农业科技创新中心资助项目(2007-620-001-03)
摘    要:为探究IbWRKY7基因在甘薯响应蔓割病病原菌侵染过程中的表达模式,以高抗蔓割病品种‘鄂薯11’为供试材料,克隆到1个新的WRKY家族基因IbWRKY7,进行生物信息学分析;并对‘鄂薯11’和蔓割病敏感品种‘栗子香’在蔓割病病原菌侵染后IbWRKY7基因的表达模式进行分析。结果显示,IbWRKY7的CDS序列全长为945 bp,编码314个氨基酸;推测其编码不稳定的亲水性蛋白,蛋白分子质量为33.92 kU,pI 9.82,含有1个WRKY七肽保守序列和1个C2HC型锌指结构。IbWRKY7基因上游2 000 bp的启动子区域内存在多种类型的顺式作用元件,如植物激素应答元件Myb、胁迫响应元件MYC和MYB等。多序列比对及系统进化树分析结果表明,IbWRKY7蛋白与日本牵牛花InWRKY7和三裂叶薯ItWRKY7亲缘关系最近。亚细胞定位预测显示IbWRKY7蛋白定位于细胞核。实时荧光定量PCR结果表明,与蔓割病病原菌侵染0 h相比,侵染2、4、12、24、48、72、96和120 h后,‘鄂薯11’的IbWRKY7基因表达量均显著提高(P<0.05);而‘栗子香’的IbWRKY7基因表达量除侵染24 h外的其他7个时间点均显著高于0 h。侵染2~48 h,‘鄂薯11’的IbWRKY7基因表达量显著高于‘栗子香’。双因素方差分析结果表明,不同品种和侵染时间点的IbWRKY7基因表达量均存在显著差异。综上,甘薯IbWRKY7基因上游2 000 bp的启动子区域含有12种激素应答和胁迫应答相关的顺式作用元件。IbWRKY7具有WRKY家族的典型结构特征,属于第Ⅲ类WRKY蛋白,氨基酸序列与同源物种相似度高,进化上高度保守。IbWRKY7基因受蔓割病病原菌侵染诱导表达,且在不同蔓割病抗性的甘薯品种中表达量差异显著。

关 键 词:甘薯  IbWRKY7  蔓割病  表达模式  基因克隆
收稿时间:2021/7/8 0:00:00

Cloning and expression analysis of IbWRKY7 gene in response to Fusarium oxysporum f. sp. batatas infection in sweet potato
LIU Yi,LIU Hongjiang,CHEN Peiru,YANG Xinsun,LEI Jian,WANG Lianjun,CHAI shash,JIN Xiaojie,YANG Yuanyuan,CHENG Xianliang,JIAO Chunhai,ZHANG Wenying.Cloning and expression analysis of IbWRKY7 gene in response to Fusarium oxysporum f. sp. batatas infection in sweet potato[J].Journal of China Agricultural University,2022,27(6):91-99.
Authors:LIU Yi  LIU Hongjiang  CHEN Peiru  YANG Xinsun  LEI Jian  WANG Lianjun  CHAI shash  JIN Xiaojie  YANG Yuanyuan  CHENG Xianliang  JIAO Chunhai  ZHANG Wenying
Institution:College of Agriculture, Yangtze University, Jingzhou 434025, China; Food Crops Institute, Hubei Academy of Agricultural Sciences, Wuhan 430064, China
Abstract:
Keywords:sweet potato   IbWRKY7  Fusarium wilt  expression pattern  gene cloning
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