| 犬蝠源呼肠病毒的分离与鉴定 |
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| 引用本文： | 冉旭华,邵昱昊,韩宗玺,陈露菲,孔宪刚,刘胜旺.犬蝠源呼肠病毒的分离与鉴定[J].中国农业科学,2007,40(8):1795-1801. |
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| 作者姓名： | 冉旭华 邵昱昊 韩宗玺 陈露菲 孔宪刚 刘胜旺 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室,哈尔滨,150001
2. 黑龙江省疾病预防控制中心,哈尔滨,150030 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 【目的】从野生蝙蝠体内分离病毒，为开展蝙蝠的病原监测奠定基础。【方法】从广东省韶关采集了30份野生犬蝠样品，研磨后接种Vero E6细胞，从中分离到2株病毒，对其中一株病毒进行研究，使用生物学与分子生物学方法确定其分类学地位。【结果】该毒株在Vero E6细胞上盲传至第4代开始出现细胞病变，表现为细胞内颗粒增多，细胞收缩、变圆，最后细胞从瓶壁脱落。反复冻融3次后，收集细胞及培养液，电镜观察发现，病毒粒子无囊膜，有双层衣壳，呈正二十面体对称，将病毒命名为Bat/China/2003（B/03）。红细胞凝集试验表明该病毒能凝集健康人O型血红细胞，不能凝集SPF鸡、实验用普通级牛、大鼠和豚鼠的红细胞。理化特性试验表明该病毒对氯仿有抵抗力、能耐受pH3.0的酸性环境、50℃水浴1 h病毒丧失感染能力、1 mol?L-1 MgCl2能提高病毒对热的抵抗力。病毒基因组经琼脂糖凝胶电泳分大、中、小3个区段。用哺乳动物呼肠病毒特异性引物进行反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR），扩增得到了预期大小的片段。测序结果经NCBI BLAST分析表明，与呼肠病毒科正呼肠病毒属的Ndelle virus核苷酸同源性最高为91.2%。用DNAMAN Multiple Alignment进行序列同源性分析，与哺乳动物呼肠病毒血清1、2、3型的代表株T1L，T2J，T3D的核苷酸同源性分别为89.9%、76.9%、89.9%。【结论】由以上结果推断该病毒为呼肠病毒科的成员。
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| 关 键 词： | 犬蝠 呼肠病毒 分离 鉴定 |
| 收稿时间： | 2006-1-18 |
| 修稿时间： | 2006-07-18 |
Isolation and Identification of Reovirus from Short-nosed Fruit Bats ( Cynopterus Sphinx) |
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| RAN Xu-hua,SHAO Yu-hao,HAN Zong-xi,CHEN Lu-fei,KONG Xian-gang,LIU Sheng-wang.Isolation and Identification of Reovirus from Short-nosed Fruit Bats ( Cynopterus Sphinx)[J].Scientia Agricultura Sinica,2007,40(8):1795-1801. |
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| Authors: | RAN Xu-hua SHAO Yu-hao HAN Zong-xi CHEN Lu-fei KONG Xian-gang LIU Sheng-wang |
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| Institution: | 1.Division of Avian Disease, National Key Laboratory of Veterinary Biotechnology, Harbin Veterinary Research Institute, Chinese . Academy of Agricultural Sciences, Harbin 150001; 2Heilongjiang Center for Disease Control and Prevention, Harbin 150030 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Short-nosed fruit bat Reovirus Isolation Identification |
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