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田野菟丝子ISSR-PCR反应体系的建立与优化
引用本文:李建辉,金则新,李钧敏.田野菟丝子ISSR-PCR反应体系的建立与优化[J].江苏农业科学,2007(4):58-61.
作者姓名:李建辉  金则新  李钧敏
作者单位:1. 杭州师范学院生命科学学院,浙江杭州,310018;台州学院生态研究所,浙江临海,317000
2. 台州学院生态研究所,浙江临海,317000
基金项目:浙江省自然科学基金 , 浙江省教育厅科学研究计划项目
摘    要:利用ISSR技术对田野菟丝子的遗传多样性进行了研究,通过筛选引物并对影响PCR扩增效果的一些因素如Mg2 浓度、牛血清白蛋白浓度、4×dNTP浓度、模板DNA用量、引物用量、TaqDNA聚合酶用量以及退火温度等指标进行优化,建立了可用于田野菟丝子ISSR分析最适宜的反应体系:10μl PCR反应体积中,1×Taq酶配套缓冲液(10 mmol/L Tris.HCl,pH值9.0,50 mmol/L KCl,0.1%Triton X-100),2.5 mmol/L MgCl2,2.0mg/ml牛血清白蛋白,0.2 mmol/L4×dNTP,10 ng模板DNA,6 pmol引物,0.3 UTaqDNA聚合酶。引物UBC811的最适退火温度为50.7℃。

关 键 词:菟丝子  ISSR  反应体系  优化
文章编号:1002-1302(2007)04-0058-03
修稿时间:2006-12-31

Establishment and optimization of ISSR -PCR reaction system for Cuscuta campestris
Li Jianhui.Establishment and optimization of ISSR -PCR reaction system for Cuscuta campestris[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2007(4):58-61.
Authors:Li Jianhui
Abstract:
Keywords:
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