适合西兰花的ISSR反应体系的建立 |
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引用本文: | 李钧敏,金则新.适合西兰花的ISSR反应体系的建立[J].江苏农业科学,2006(1):79-81. |
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作者姓名: | 李钧敏 金则新 |
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作者单位: | 台州学院生态研究所,浙江临海,317000 |
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基金项目: | 浙江省自然科学基金项目(编号:Y504220) |
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摘 要: | 以西兰花基因组DNA为材料,对ISSR-PCR反应体系中各种影响因子如镁离子浓度、dNTP浓度、模板DNA含量、Taq DNA聚合酶量BSA浓度、引物用量、甘油浓度以及最适退火温度等进行了优化和筛选,建立了适合西兰花的ISSR反应体系:10μl PCR反应体积,1×Taq酶配套缓冲液(10 mmol/L Tris.HC l,pH值9.0,50mmol/L KC l,0.1%Triton X-100),2.0 mmol/L MgC l2,0.75 U Taq酶,5 ng模板DNA,12 pmol引物,dATP、dCTP、dGTP、dTTP各0.2 mmol/L,4 mg/m l BSA,西兰花的最适退火温度为48.5℃。
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关 键 词: | 西兰花 ISSR 反应体系 优化 |
文章编号: | 1002-1302(2006)01-0079-03 |
收稿时间: | 2005-08-23 |
修稿时间: | 2005年8月23日 |
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