| 鸡源禽腺病毒的LMH细胞传代及细胞传代毒株对SPF鸡的致病性 |
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| 引用本文： | 魏燕鸣,龚文孝,杨影,马季,邹忠,金梅林.鸡源禽腺病毒的LMH细胞传代及细胞传代毒株对SPF鸡的致病性[J].华中农业大学学报,2020,39(2):95-101. |
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| 作者姓名： | 魏燕鸣 龚文孝 杨影 马季 邹忠 金梅林 |
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| 作者单位： | 华中农业大学动物医学院,武汉 430070;武汉科前生物股份有限公司,武汉 430070 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划项目（2016YFD0501600） |
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| 摘 要： | 为建立禽腺病毒4型的禽源细胞感染模型,并考察细胞培养毒株对动物的致病性,将实验室2014-2017年间分离的5株血清4型禽腺病毒接种鸡肝癌细胞(leghorn male hepatocellular cells,LMH)并盲传,选取各病毒的LMH细胞培养物,按一定剂量经腿部肌肉注射接种4周龄SPF鸡;记录试验动物的发病情况,剖检采集发病或死亡鸡的脏器并制作病理切片,观察并分析病毒细胞培养物感染SPF鸡的组织病理变化。结果发现:5株血清4型禽腺病毒在LMH细胞上盲传至第4代时开始出现I群禽腺病毒所致的特异性细胞病变,提取培养物中病毒核酸并进行PCR鉴定,均能扩增出大小约564bp的特异性扩增片段,表明病毒能在LMH细胞上稳定增殖。选取各病毒第10代细胞培养物进行SPF鸡回归试验,发现细胞培养上清接种4周龄SPF鸡后第3天开始,有部分鸡开始精神沉郁,食欲消退、卧地不起瘫痪并迅速死亡,病理剖检及病理组织切片结果显示HB-1、HB-2、HB-3和SD-1毒株保持对4周龄SPF鸡的致病性,病死鸡中能观察到典型的组织病理学变化,而对照组不出现任何临床症状及病理变化。以上结果表明,LMH细胞可用于禽腺病毒增殖传代,是开展禽腺病毒分子致病机制研究的理想细胞模型。
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| 关 键 词： | 禽腺病毒 鸡肝癌细胞 包涵体 心包积水 病毒传代 细胞感染模型 灭活疫苗 弱毒活疫苗 |
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