| 基于α_s-酪蛋白特异性的牛乳总蛋白质ELISA定量检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 张咪,高璐,印伯星,苏万业,杨振泉,顾瑞霞.基于α_s-酪蛋白特异性的牛乳总蛋白质ELISA定量检测方法的建立[J].江苏农业学报,2015,31(1). |
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| 作者姓名： | 张咪 高璐 印伯星 苏万业 杨振泉 顾瑞霞 |
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| 作者单位： | 1. 扬州大学食品科学与工程学院,江苏 扬州,225127
2. 扬州市康源乳业有限公司,江苏 扬州,225009
3. 扬州大学食品科学与工程学院,江苏 扬州 225127;江苏省乳品生物技术与安全控制重点实验室,江苏扬州225127 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，扬州市科技攻关项目，江苏省青蓝工程资助项目 |
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| 摘 要： | 本研究旨在建立牛乳中总蛋白质的ELISA定量检测方法,并评价该方法在牛乳掺假辨识中的应用效果。首先用αs-酪蛋白标准品免疫新西兰白兔,制备αs-酪蛋白特异性抗血清,并建立αs-酪蛋白的间接ELISA检测方法,结果显示血清效价为1∶640,αs-酪蛋白检测的线性范围是25~600 ng/ml,R2=0.999 5,回收率是96.6%~105.2%。再应用乳成分分析仪,凯氏定氮法和所建立的ELISA法测定8份来源不同的原料乳中总蛋白和αs-酪蛋白含量,结果显示不同牛乳中总蛋白质含量在0.029 2~0.029 8 g/ml,αs-酪蛋白含量在0.008 4~0.009 2 g/ml,占牛乳总蛋白质的比例恒定,平均为0.3,并用该系数建立牛乳中总蛋白质的定量方法。最后对5份人为兑水稀释、添加尿素、BSA和三聚氰胺的模拟掺杂牛乳样品进行检测,测定结果表明基于αs-酪蛋白的ELISA方法比乳成分分析仪法和凯氏定氮法具有更高的灵敏性和特异性,含氮添加物对测定结果无显著影响(P0.05),更适合于作为原料乳及含乳产品中牛乳蛋白质的定量分析。
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| 关 键 词： | 牛乳 αs-酪蛋白 ELISA 总蛋白 |
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