| 塞尼卡谷病毒3ABC蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备 |
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| 引用本文： | 连凯琪,周玲玲,张明亮,张慢,王英杰,林正丹,宋玉伟.塞尼卡谷病毒3ABC蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备[J].河南农业科学,2020,49(1):123-127. |
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| 作者姓名： | 连凯琪 周玲玲 张明亮 张慢 王英杰 林正丹 宋玉伟 |
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| 作者单位： | 安阳工学院生物与食品工程学院/河南省动物疫病防控与营养免疫院士工作站/河南省兽用生物制品研发与应用国际联合实验室,河南安阳455000;安阳工学院生物与食品工程学院/河南省动物疫病防控与营养免疫院士工作站/河南省兽用生物制品研发与应用国际联合实验室,河南安阳455000;安阳工学院生物与食品工程学院/河南省动物疫病防控与营养免疫院士工作站/河南省兽用生物制品研发与应用国际联合实验室,河南安阳455000;安阳工学院生物与食品工程学院/河南省动物疫病防控与营养免疫院士工作站/河南省兽用生物制品研发与应用国际联合实验室,河南安阳455000;安阳工学院生物与食品工程学院/河南省动物疫病防控与营养免疫院士工作站/河南省兽用生物制品研发与应用国际联合实验室,河南安阳455000;安阳工学院生物与食品工程学院/河南省动物疫病防控与营养免疫院士工作站/河南省兽用生物制品研发与应用国际联合实验室,河南安阳455000;安阳工学院生物与食品工程学院/河南省动物疫病防控与营养免疫院士工作站/河南省兽用生物制品研发与应用国际联合实验室,河南安阳455000 |
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| 基金项目： | 安阳市科技发展计划项目;安阳工学院青年科研基金;河南省高等学校重点研发项目;国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 为了开发塞尼卡谷病毒(Seneca Valley virus,SVV)的检测试剂盒,克隆3ABC基因进行原核表达和纯化,并将纯化的3ABC蛋白免疫大鼠,制备抗3ABC蛋白的多克隆抗体。通过Western blot鉴定制备的多克隆抗体与表达的3ABC蛋白的特异性识别能力,通过ELISA测定多克隆抗体的效价。结果显示,3ABC基因在大肠杆菌中大量表达,且主要以包涵体形式表达,重组蛋白分子质量约为55 ku,经纯化后得到单一条带。免疫大鼠制备的多克隆抗体效价大于1∶64 000,且与表达的3ABC重组蛋白发生特异性反应。综上,在大肠杆菌中成功表达了SVV 3ABC蛋白,且表达的重组蛋白具有免疫原性。
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| 关 键 词： | 塞尼卡谷病毒 3ABC蛋白 原核表达 蛋白质纯化 多克隆抗体 |
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