| 猪IFN-α8的原核表达及抗猪繁殖与呼吸综合征病毒活性研究 |
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| 引用本文： | 方剑玉,张青娴,郎利敏,徐彬,王改利,席燕燕,冯现明,王克领,李绍钰.猪IFN-α8的原核表达及抗猪繁殖与呼吸综合征病毒活性研究[J].河南农业科学,2023(9):141-147. |
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| 作者姓名： | 方剑玉 张青娴 郎利敏 徐彬 王改利 席燕燕 冯现明 王克领 李绍钰 |
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| 作者单位： | 1. 河南省农业科学院畜牧兽医研究所;2. 河南省农业科学院畜禽繁育与营养调控河南省重点实验室;3. 林州市动物疫病预防控制中心 |
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| 基金项目： | 河南省科技攻关项目（222102110054）； |
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| 摘 要： | 为确定猪干扰素α8(poIFN-α8)蛋白对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的抗病毒作用，合成poIFN-α8基因，克隆入pCSMH大肠杆菌表达载体，将重组表达载体转化DH5α感受态细胞，进行温度诱导表达后，收集菌体进行SDS-PAGE电泳。将表达的目的蛋白利用Ni-琼脂糖凝胶纯化柱纯化后，采用Western blot试验检测重组poIFN-α8的反应原性，利用猪肺泡巨噬细胞（PAM）检测0.01、0.05、0.1、1 ng/mL的重组poIFN-α8蛋白对PRRSV的抗病毒活性，并检测重组poIFN-α8蛋白对下游干扰素刺激基因（ISG）Mx1、OAS1、ISG15的诱导激活作用。结果表明，成功构建了pCSMH-IFN-α8表达载体，实现了poIFN-α8在大肠杆菌中的包涵体表达，且重组poIFN-α8蛋白具有良好的反应原性；0.05 ng/mL的重组poIFN-α8蛋白可显著抑制PRRSV在PAM中的复制，poIFN-α8的抗病毒效果显著优于猪干扰素α2(poIFN-α2)、猪干扰素α5(poIFN-α5)，且重组poIFN-α8能有效激活ISG的表达。综上，表达的重组poIF...
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| 关 键 词： | 猪干扰素α8 大肠杆菌表达 猪繁殖与呼吸综合征病毒 干扰素刺激基因 抗病毒活性 |
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