| 呋喃它酮代谢物人工抗原的合成及抗体的制备 |
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| 引用本文： | 束建花,郭红艳,王立琦,高 艳,曾振灵.呋喃它酮代谢物人工抗原的合成及抗体的制备[J].华南农业大学学报,2014,35(2):18-23. |
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| 作者姓名： | 束建花 郭红艳 王立琦 高 艳 曾振灵 |
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| 作者单位： | 华南农业大学 兽医学院;华南农业大学 兽医学院;华南农业大学 兽医学院;华南农业大学 兽医学院;华南农业大学 兽医学院 |
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| 基金项目： | 农业部兽药质量安全监管项目(农财发［2012］36号) |
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| 摘 要： | 【目的】建立高灵敏度的呋喃它酮酶联免疫检测方法.【方法】以戊二醛法将呋喃它酮代谢物5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮(AMOZ)与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联,再由NaBH4还原西佛碱得到结构稳定的免疫原AMOZ-BSA和AMOZ-OVA;用对醛基苯甲酸(CPA)对AMOZ进行衍生化,得到衍生物CPAMOZ,由质谱鉴定,经N-羟基琥珀酰亚胺活化酯法将CPAMOZ与BSA和OVA偶联得到免疫原CPAMOZ-BSA和包被原CPAMOZ-OVA.经紫外扫描鉴定表明人工抗原合成成功.免疫Balb/c小鼠,ic-ELISA方法测定鼠血清多克隆抗体对AMOZ和NPAMOZ的特异性.【结果和结论】结果显示CPAMOZ-BSA免疫制备的抗体对NPAMOZ有良好的特异性.抗体效价为1∶32×104,对NPAMOZ的半抑制质量浓度为4.53 ng·mL-1;抗血清与CPAMOZ、AMOZ及呋喃它酮的交叉反应率为78.6%、1.5%及4.6%;与其他3种硝基呋喃类原药及其代谢物对硝基苯甲醛、对醛基苯甲酸等结构相似物的交叉反应均小于0.01%.
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| 关 键 词： | 呋喃它酮代谢物 半抗原 多克隆抗体 酶联免疫测定法 |
| 收稿时间： | 2013/5/31 0:00:00 |
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