| 赤皮青冈ISSR-PCR反应体系的建立与优化 |
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| 引用本文： | 朱品红,李志辉,杨模华.赤皮青冈ISSR-PCR反应体系的建立与优化[J].中南林业科技大学学报,2014(6):61-65,80. |
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| 作者姓名： | 朱品红 李志辉 杨模华 |
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| 作者单位： | 中南林业科技大学林学院; |
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| 基金项目： | “十二五”国家科技支撑项目“楸树和赤皮青冈珍贵用材林定向培育技术研究与示范”(2012BAD21B03) |
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| 摘 要： | 为建立适宜于赤皮青冈ISSR分析的扩增体系,以赤皮青冈叶片基因组DNA为材料,采用单因素和正交设计相结合的方法系统地测试模板DNA、Mg2+、引物、磷酸碱基脱氧核苷(dNTPs)浓度,Taq DNA聚合酶用量和退火温度这6个因素对ISSR-PCR反应结果的影响。综合分析表明:优化后的最佳反应体系为20μL反应总体系中,含20 ng模板DNA,2.5 mmoL/L Mg2+,0.2 mmoL/L dNTPs,1.0 U Taq DNA聚合酶,0.2μmoL/L引物;UBC 808号作引物最佳退火温度为59.3℃。这一优化体系的建立为进一步开展赤皮青冈遗传多样性的ISSR分析奠定了基础。
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| 关 键 词： | 赤皮青冈 ISSR-PCR 正交设计 单因素试验 优化 |
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