| 利用SMART技术构建珙桐叶片全长cDNA文库 |
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| 引用本文： | 徐刚标,房学爽,叶翠层.利用SMART技术构建珙桐叶片全长cDNA文库[J].中南林业科技大学学报,2008,28(6). |
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| 作者姓名： | 徐刚标 房学爽 叶翠层 |
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| 作者单位： | 中南林业科技大学 |
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| 基金项目： | 湖南省自然科学基金，教育部留学人员科研启动基金联合资助项目 |
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| 摘 要： | 以珙桐叶片为研究材料,用Rneasy Plant Mini Kit提取珙桐叶片组织总RNA,反转录成单链cDNA,长距离PCR方法合成双链cDNA;PCR产物经蛋白酶K消化、SfiI酶切后,采用CHROMA SPIN-400柱分级分离,回收0.5 kb以上的cDNA组分,以λTriplEx2载体连接并进行体外包装,构建了珙桐叶全长cDNA文库.结果表明:以XL1-Blue、BM25.8为受体菌测定的原始文库滴度为8.3×106pfu/mL,扩增后文库总滴度为4.16×108pfu/mL,重组率为97.3%;对随机挑取的噬菌斑进行PCR鉴定,表明插入片段大多分布在0.5~2.0 kb之间,文库质量较高.这为进一步开展珙桐EST测序分析、目的基因克隆及功能基因组学研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 生物技术 珙桐 叶 全长cDNA文库 SMART技术 |
Construction of Full-length cDNA Library For Leaves of Dove Tree by SMART Technique |
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| XU Gang-biao,FANG Xue-shuang,YE Cui-ceng.Construction of Full-length cDNA Library For Leaves of Dove Tree by SMART Technique[J].Journal of Central South Forestry University,2008,28(6). |
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| Authors: | XU Gang-biao FANG Xue-shuang YE Cui-ceng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | biotechnology Dove tree leaf full-length cDNA library SMART technique |
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