| 光皮桦BlBLH1基因的克隆、表达及互作蛋白筛选 |
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| 引用本文： | 庄和必,俞子承,林二培,黄华宏.光皮桦BlBLH1基因的克隆、表达及互作蛋白筛选[J].林业科学,2022,58(3):59-68. |
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| 作者姓名： | 庄和必 俞子承 林二培 黄华宏 |
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| 作者单位： | 浙江农林大学 亚热带森林培育国家重点实验室 杭州 311300 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31770641)；;浙江省重点研发计划(2021C02037)； |
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| 摘 要： | 【目的】BLH基因家族是广泛存在于植物中的转录因子，其与KNOX等转录因子的互作被认为在植物的次生壁发育中起重要调控作用。本研究拟克隆光皮桦BlBLH1基因，分析其表达模式，并筛选能与其互作的蛋白。【方法】利用Blast等软件在光皮桦基因组序列中鉴定获得BlBLH1序列，克隆验证后对其进行多序列比对、系统进化等生物信息学分析；利用实时荧光定量PCR分析BlBLH1在光皮桦不同组织、器官和应拉木形成中的表达模式；通过酵母双杂交技术筛选BlBLH1互作的蛋白，并采用双分子荧光互补实验(BiFC)进一步验证其与部分蛋白在拟南芥细胞内的互作。【结果】BlBLH1基因序列全长为2 128 bp,开放阅读框(ORF)为1 830 bp,编码609个氨基酸，具有SKY、BEL和HD 3个保守结构域。系统进化分析显示，BlBLH1与拟南芥BLH1有最近的同源关系。表达分析显示BlBLH1在雄花序中的表达量最高；在木质化茎段中的表达量次之；在应拉木诱导过程中，BlBLH1在应拉木中的表达量均显著高于对照。通过酵母双杂交筛选获得结构蛋白、酶、转录因子等47个与BlBLH1互作较强的蛋白；BiFC验证结果表...
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| 关 键 词： | BlBLH1 次生壁 酵母双杂交 双分子荧光互补 |
Cloning,Expression and Interaction Protein Screening of BlBLH1 Gene in Betula luminifera |
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| Zhuang Hebi,Yu Zicheng,Lin Erpei,Huang Huahong.Cloning,Expression and Interaction Protein Screening of BlBLH1 Gene in Betula luminifera[J].Scientia Silvae Sinicae,2022,58(3):59-68. |
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| Authors: | Zhuang Hebi Yu Zicheng Lin Erpei Huang Huahong |
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