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北美鹅掌楸LtCHS基因的克隆及生物信息学与组织表达特征分析
引用本文:罗群凤,胥猛,冯源恒,徐嘉娟,李火根.北美鹅掌楸LtCHS基因的克隆及生物信息学与组织表达特征分析[J].林业科学,2015(5).
作者姓名:罗群凤  胥猛  冯源恒  徐嘉娟  李火根
作者单位:1. 南京林业大学 林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室 南京 210037; 广西壮族自治区林业科学研究院 南宁 530002
2. 南京林业大学 林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室 南京 210037
基金项目:国家自然科学基金项目(30972391
摘    要:【目的】鹅掌楸属花色种间差异较大,是研究木本植物花色形成与调控机制的较理想材料。查尔酮合成酶基因( CHS)是黄酮类化合物生物合成途径中的关键基因,与植物花色形成密切相关,同时又是研究科以下系统发育的理想基因,种间进化差异较大,因此 CHS基因用于研究鹅掌楸属花色差异形成机制有较强的可行性。本研究克隆北美鹅掌楸的查尔酮合成酶基因,并对其进行生物信息学及组织表达分析,以期为鹅掌楸属树种花色的形成和调控机制研究提供参考。【方法】以北美鹅掌楸的花芽为材料,采用同源克隆和 RACE 技术克隆查尔酮合成酶基因( LtCHS),并进一步扩增该基因的基因组序列。对该基因进行生物信息学分析。采用半定量 RT-PCR 方法分析 LtCHS基因在鹅掌楸属种间及不同组织中的表达水平。【结果】获得2个查尔酮合成酶基因: LtCHS1与LtCHS2。LtCHS1基因的 cDNA全长875 bp,包含1个702 bp的ORF,其基因组DNA ( gDNA)只含有1个外显子,没有内含子,编码233个氨基酸,蛋白质分子量为71.88 kDa,等电点为5.09。LtCHS2基因的 cDNA 全长1457 bp,包括1个1185 bp的 ORF,其 gDNA含有2个外显子和1个内含子,编码394个氨基酸,蛋白质分子量为120.0 kDa,等电点为4.97。2个基因的组织表达分析结果显示,LtCHS 基因不仅在同一树种不同组织间存在差异,而且在种间也存在表达差异。LtCHS1基因仅在北美鹅掌楸中表达,LtCHS2基因在鹅掌楸中表达,在杂交鹅掌楸中二者均有表达。【结论】获得的2个 LtCHS基因属于同一基因家族,但执行不同功能。二者在种间表达存在差异可能与鹅掌楸属花色形成有关。结合鹅掌楸属种间花色特征,可初步推测,LtCHS1基因与 LtCHS2基因可能分别调控不同类型花青素的合成。

关 键 词:北美鹅掌楸  查尔酮合成酶  基因克隆  半定量RT-PCR  组织表达

Cloning and Bioinformatics of Chalcone Synthase Gene (CHS) in Liriodendron tulipifera and Characterization of Its Tissue Expression
Luo Qunfeng,Xu Meng,Feng Yuanheng,Xu Jiajuan,Li Huogen.Cloning and Bioinformatics of Chalcone Synthase Gene (CHS) in Liriodendron tulipifera and Characterization of Its Tissue Expression[J].Scientia Silvae Sinicae,2015(5).
Authors:Luo Qunfeng  Xu Meng  Feng Yuanheng  Xu Jiajuan  Li Huogen
Abstract:
Keywords:Liriodendron tulipifera  chalcone synthase  gene cloning  semi-quantitative RT-PCR  tissue expression
本文献已被 万方数据 等数据库收录!
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