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菠萝凋萎相关病毒-3实时荧光定量PCR检测方法的建立
引用本文:胡加谊,李向宏,罗志文,范鸿雁,张治礼,刘志昕,何凡.菠萝凋萎相关病毒-3实时荧光定量PCR检测方法的建立[J].果树学报,2015(1):156-162.
作者姓名:胡加谊  李向宏  罗志文  范鸿雁  张治礼  刘志昕  何凡
作者单位:海南省农业科学院热带果树研究所·农业部海口热带果树科学观测实验站;海南省农垦科学院;中国热带农业科学院热带生物技术研究所
基金项目:公益性行业(农业)科研专项经费项目(201203021);海南省重大科技项目子课题(ZDZX2013020-3);海南省科学事业费项目(琼财预[2013]131号);海南省重点科技计划应用研究及产业化项目(ZDXM20130031);海南省自然科学基金项目(琼科[2013]32号)
摘    要:【目的】建立菠萝凋萎相关病毒-3实时荧光定量PCR检测方法。【方法】根据PMWa V-3外壳蛋白基因的保守区域设计特异性引物和探针,通过优化PMWa V-3实时荧光定量PCR检测体系,构建以重组质粒为标准品的标准曲线,建立起PMWa V-3实时荧光定量PCR检测方法。【结果】该方法能特异性地检测PMWa V-3,且灵敏度是普通RTPCR的10倍;该方法重复性良好,组间和组内变异系数均小于1.73。【结论】建立的实时荧光定量PCR方法是一种快速、简便、可信度高的PMWa V-3定量检测方法。

关 键 词:菠萝凋萎相关病毒-3  实时荧光定量PCR  TaqMan探针  检测

Detection of Pineapple mealybug wilt associated virus-3 by Real-Time Fluorescent Quantitative RT-PCR
HU Jiayi;LI Xianghong;LUO Zhiwen;FAN Hongyan;ZHANG Zhili;LIU Zhixin;HE Fan.Detection of Pineapple mealybug wilt associated virus-3 by Real-Time Fluorescent Quantitative RT-PCR[J].Journal of Fruit Science,2015(1):156-162.
Authors:HU Jiayi;LI Xianghong;LUO Zhiwen;FAN Hongyan;ZHANG Zhili;LIU Zhixin;HE Fan
Institution:HU Jiayi;LI Xianghong;LUO Zhiwen;FAN Hongyan;ZHANG Zhili;LIU Zhixin;HE Fan;Institute of Tropical Fruit Trees,Hainan Academy of Agricultural Science/Haikou Investigation Station of Tropical Fruit Trees,Ministry of Agriculture;College of Environment and Plant Protection,Hainan University;Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology,Chinese Academy of Tropical Agricultural Science;
Abstract:
Keywords:
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