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橡胶树肌动蛋白解聚因子原核表达及纯化
引用本文:邓治,杜磊,李德军.橡胶树肌动蛋白解聚因子原核表达及纯化[J].热带作物学报,2014,35(2):277-281.
作者姓名:邓治  杜磊  李德军
作者单位:中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室;1 中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室 2 三峡大学化学与生命科学学院;中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室
基金项目:国家重点基础研究发展计划“橡胶树产胶调控机制与转基因种质创新”(No. 2012CB723005);国家自然科学基金“橡胶树排胶相关ADF基因参与乳管堵塞的机制研究”(No. 31200514);海南省自然科学基金“肌动蛋白解聚因子与橡胶树死皮的关系研究”(No. 311087)。
摘    要:本研究根据HbADF序列设计引物扩增基因的编码区,并将其插入到原核表达载体pET28a上,成功构建重组质粒pET28a-HbADF。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌,经1 mmol/L IPTG诱导,获得相对分子量为20 ku的融合蛋白。表达蛋白以可溶和包涵体两种形式存在,通过亲和层析方法纯化可溶蛋白并获得HbADF融合蛋白,用抗HIS标签的单抗对纯化蛋白进行了Western blot鉴定。该结果为进一步研究HbADF蛋白特性及功能奠定基础。

关 键 词:肌动蛋白解聚因子  橡胶树  原核表达  蛋白纯化  Western  blot

Prokaryotic Expression and Purification of Actin Depolymerizing Factor in Rubber Tree
DENG Zhi,DU Lei and LI Dejun.Prokaryotic Expression and Purification of Actin Depolymerizing Factor in Rubber Tree[J].Chinese Journal of Tropical Crops,2014,35(2):277-281.
Authors:DENG Zhi  DU Lei and LI Dejun
Institution:Rubber Research Institute, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences,Key Laboratory of Biology and Genetic Resources of Rubber Tree, Ministry of Agriculture;1 Rubber Research Institute, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences,Key Laboratory of Biology and Genetic Resources of Rubber Tree, Ministry of Agriculture 2 College of Chemistry and Life Science, Three Gorges University;Rubber Research Institute, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences,Key Laboratory of Biology and Genetic Resources of Rubber Tree, Ministry of Agriculture
Abstract:
Keywords:Actin depolymerizing factor  Rubber tree  Prokaryotic expression  Pprotein purification  Western blot
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