| 泥蚶乙二醛酶Ⅰ基因的克隆及时空表达特征分析 |
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| 引用本文： | 姚韩韩,董迎辉,姚彬彬,包永波,林志华.泥蚶乙二醛酶Ⅰ基因的克隆及时空表达特征分析[J].水产学报,2014,38(9):1302-1309. |
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| 作者姓名： | 姚韩韩 董迎辉 姚彬彬 包永波 林志华 |
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| 作者单位： | 浙江万里学院浙江省水产种质资源高效利用技术研究重点实验室, 浙江 宁波 315100;浙江万里学院浙江省水产种质资源高效利用技术研究重点实验室, 浙江 宁波 315100;浙江万里学院浙江省水产种质资源高效利用技术研究重点实验室, 浙江 宁波 315100;浙江万里学院浙江省水产种质资源高效利用技术研究重点实验室, 浙江 宁波 315100;浙江万里学院浙江省水产种质资源高效利用技术研究重点实验室, 浙江 宁波 315100 |
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| 基金项目： | 国家现代贝类产业技术体系项目（CARS-48）；浙江省自然科学基金重点建设专项（LZ12C19001）；宁波市科技创新团队项目（2011B82017）；浙江省重中之重学科开放基金项目（ZS2012015） |
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| 摘 要： | 为探索贝类乙二醛酶Ⅰ基因的结构及功能特征,实验利用RACE技术首次克隆获得泥蚶乙二醛Ⅰ基因(Tg-GLOI)的cDNA全长序列,并对其氨基酸序列特征及时空表达特征进行了研究。结果发现,Tg-GLOI基因的cDNA全长序列为1 807 bp,开放阅读框为540 bp,编码180个氨基酸,在27~169 aa处具有典型的乙二醛酶系保守序列;成熟的乙二醛酶Ⅰ由2个相同的亚基组成,每个亚基由乙二醛Ⅰ基因编码,其二级结构由18个α-螺旋、20个β-折叠片和36个转角组成,每个亚基各含1个Zn2+;氨基酸序列比对发现,Tg-GLOI氨基酸序列与太平洋牡蛎的同源性达到86.1%,与其他脊椎动物的同源性也都在70%以上,表现出高度保守性。qRT-PCR结果显示,Tg-GLOI基因在泥蚶成贝8个组织中均有表达,在内脏团中的表达量最高,极显著地高于其他组织(P0.01);在各发育时期中,Tg-GLOI表达量随发育进程呈逐渐升高的趋势,在眼点幼虫期达到最高,极显著高于其他时期(P0.01),而在幼虫变态至稚贝时,表达量又极显著地下降(P0.01)。研究表明,Tg-GLOI具有类似于高等动物的分子结构,并在泥蚶不同组织、不同发育时期表达差异显著,这为进一步研究该酶在贝类中的功能和作用机制奠定了重要基础。
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| 关 键 词： | 泥蚶 乙二醛酶Ⅰ基因 基因克隆 时空表达 荧光定量PCR |
| 收稿时间： | 2014/4/16 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2014/6/23 0:00:00 |
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