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| RNA干扰技术抑制新加坡石斑鱼虹彩病毒感染细胞多肽ICP46与绿色荧光蛋白融合基因的表达 | |
| 引用本文： | 夏立群,梁海鹰,张红莲,秦启伟.RNA干扰技术抑制新加坡石斑鱼虹彩病毒感染细胞多肽ICP46与绿色荧光蛋白融合基因的表达[J].水产学报,2010,34(4). |
| 作者姓名： | 夏立群 梁海鹰 张红莲 秦启伟 |
| 作者单位： | 1. 广东海洋大学水产学院,广东,湛江,524025;中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室,广东,广州,510275 2. 广东海洋大学水产学院,广东,湛江,524025 3. 中国科学院南海海洋研究所中国科学院海洋生物资源可持续利用重点实验室,广东,广州,510301 |
| 基金项目： | 国家“八六三”高技术研究发展计划(2006AA09Z411,2006AA100306); 国家自然科学基金项目(30930070); 广东省自然科学基金项目(06104920) |
| 摘 要： | 新加坡石斑鱼虹彩病毒(singapore grouper iridovirus,SGIV)是一种严重的能引起全身性疾病的病原体,对石斑鱼养殖造成了重大的经济损失。将含有SGIV感染细胞多肽ICP46(infected cell polypeptides 46)基因的真核表达载体pEGFP-ICP46转染到胖头鲤细胞(fathead minnow cells,FHM)中进行融合表达,用荧光显微镜观察到ICP46-GFP融合蛋白主要分布于FHM细胞的细胞质中。根据SGIVICP46的序列,设计并体外化学合成了特异性干扰SGIVICP46的siRNA(siRNA-ICP46),与pEGFP-ICP46共转染到FHM细胞中,通过荧光显微镜观察不同时间点荧光强度的变化。转染后24～48h,实验细胞(共转染siRNA-ICP46和pEGFP-ICP46)和阳性对照细胞(共转染siRNA-GFP和pEGFP-ICP46)中的荧光微弱,发荧光的细胞数量较阴性对照(共转染siRNA-Negative和pEGFP-ICP46)少70%左右,但其后实验细胞和阳性对照细胞的荧光强度开始增强,在转染后72h其与阴性对照组已差别不大。说... |
| 关 键 词： | RNA干扰 绿色荧光蛋白 石斑鱼虹彩病毒 感染细胞多肽ICP46 |
The inhibition of expression of SGIV ICP46-GFP in FHM cell by RNA interferencing |
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| XIA Li-qun,LIANG Hai-ying,ZHANG hong-lian,QIN Qi-wei.The inhibition of expression of SGIV ICP46-GFP in FHM cell by RNA interferencing[J].Journal of Fisheries of China,2010,34(4). | |
| Authors: | XIA Li-qun LIANG Hai-ying ZHANG hong-lian QIN Qi-wei |
| Institution: | XIA Li-qun1,2,LIANG Hai-ying1,ZHANG hong-lian1,QIN Qi-wei3(1.College of Fishery,Guangdong Ocean University,Zhanjiang 524025,China,2.State Key Laboratory of Biocontrol,Sun Yat-sen University,Guangzhou 510275,3.South China Sea Institute of Oceanology,Chinese Academy of Sciences,Guangzhou 510301,China) |
| Abstract: | Singapore grouper iridovirus(SGIV),as a causative agent of serious systemic disease,resulted in significant economic losses in grouper aquaculture.In this study,recombinant eukaryotic vector pEGFP-ICP46 which was inserted with SGIV ICP46(infected cell polypeptides 46) gene was transfected into fathead minnow(FHM) cells,and ICP46-GFP fusion protein was successfully expressed in the cytoplasm of FHM cells.Candidate siRNA targeting SGIV ICP46 gene(siRNA-ICP46) was designed and chemically synthesized.To investi... |
| Keywords: | RNA interference green fluorescent protein Singapore grouper iridovirus(SGIV) infected cell polypeptides(ICP46) |
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