| 罗非鱼无乳链球菌LrrG蛋白的原核表达及免疫原性分析 |
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| 引用本文： | 陈雪,可小丽,卢迈新,刘志刚,高风英,朱华平,曹建萌.罗非鱼无乳链球菌LrrG蛋白的原核表达及免疫原性分析[J].水产学报,2014,38(5):713-721. |
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| 作者姓名： | 陈雪 可小丽 卢迈新 刘志刚 高风英 朱华平 曹建萌 |
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| 作者单位： | 中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室, 广东 广州 510380;上海海洋大学水产与生命学院, 上海 201306;中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室, 广东 广州 510380;中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室, 广东 广州 510380;中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室, 广东 广州 510380;中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室, 广东 广州 510380;中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室, 广东 广州 510380;中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室, 广东 广州 510380 |
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| 基金项目： | 现代农业产业技术体系专项资金资助（CARS-49）；广州市科技计划项目（2013J4100078；201300000064） |
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| 摘 要： | LrrG蛋白是无乳链球菌较保守的表面蛋白之一。为获得罗非鱼源无乳链球菌LrrG蛋白并探讨其在罗非鱼体内的免疫原性,本实验根据GenBank中已报道的人源无乳链球菌LrrG基因序列,设计特异性引物,扩增获得罗非鱼源无乳链球菌的LrrG基因。分析表明,其ORF为2 361 bp,编码786个氨基酸,与人源无乳链球菌LrrG基因核苷酸序列的相似性高达98.48%。LrrG蛋白含有3个保守的LRR结构域,并可形成多个抗原表位。将LrrG基因片段克隆转入原核表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET-32a(+)/LrrG,E.coli BL21(DE3)22℃诱导表达6 h。SDS-PAGE显示,诱导表达蛋白的分子量为108.9 ku,并且该重组蛋白以可溶和包涵体2种形式存在。经His Bind亲和柱纯化及超滤管浓缩后,LrrG可溶蛋白浓度达3.40 mg/mL。鱼体注射免疫实验表明,LrrG可溶蛋白对罗非鱼的相对免疫保护率达69.28%,且免疫后4周的血清抗体滴度为1∶800。该研究为深入探讨无乳链球菌LrrG蛋白作为罗非鱼基因工程疫苗的潜在应用价值奠定了基础。
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| 关 键 词： | 罗非鱼 无乳链球菌 LrrG蛋白 原核表达 蛋白纯化 免疫原性 |
| 收稿时间： | 2014/1/17 0:00:00 |
| 修稿时间： | 3/8/2014 12:00:00 AM |
Prokaryotic expression and immunogenicity analysis of LrrG protein of Streptococcus agalactiae isolated from tilapia |
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| CHEN Xue,KE Xiaoli,LU Maixin,LIU Zhigang,GAO Fengying,ZHU Huaping and CAO Jianmeng.Prokaryotic expression and immunogenicity analysis of LrrG protein of Streptococcus agalactiae isolated from tilapia[J].Journal of Fisheries of China,2014,38(5):713-721. |
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| Authors: | CHEN Xue KE Xiaoli LU Maixin LIU Zhigang GAO Fengying ZHU Huaping and CAO Jianmeng |
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| Institution: | Pearl River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fisheries Science, Key Laboratory of Tropical & Subtropical Fishery Resource Application & Cultivation, Ministry of Agriculture, Guangzhou 510380, China;College of Fisheries & Life, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China;Pearl River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fisheries Science, Key Laboratory of Tropical & Subtropical Fishery Resource Application & Cultivation, Ministry of Agriculture, Guangzhou 510380, China;Pearl River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fisheries Science, Key Laboratory of Tropical & Subtropical Fishery Resource Application & Cultivation, Ministry of Agriculture, Guangzhou 510380, China;Pearl River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fisheries Science, Key Laboratory of Tropical & Subtropical Fishery Resource Application & Cultivation, Ministry of Agriculture, Guangzhou 510380, China;Pearl River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fisheries Science, Key Laboratory of Tropical & Subtropical Fishery Resource Application & Cultivation, Ministry of Agriculture, Guangzhou 510380, China;Pearl River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fisheries Science, Key Laboratory of Tropical & Subtropical Fishery Resource Application & Cultivation, Ministry of Agriculture, Guangzhou 510380, China;Pearl River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fisheries Science, Key Laboratory of Tropical & Subtropical Fishery Resource Application & Cultivation, Ministry of Agriculture, Guangzhou 510380, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | tilapia Streptococcus agalactiae LrrG protein prokaryotic expression protein purification immunogenicity |
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