| 半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Günther)IGF-Ⅱ的体外重组表达 |
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| 作者姓名： | 徐永江 柳学周 张 凯 武宁宁 刘芝亮 李春广 |
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| 作者单位： | 农业部海洋渔业可持续发展重点实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所 青岛 266071,农业部海洋渔业可持续发展重点实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所 青岛 266072,青岛贝宝海洋科技有限公司 青岛 266400;,青岛市海洋与渔业局渔业技术推广站 青岛 266071,农业部海洋渔业可持续发展重点实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所 青岛 266075,绍兴市鸿港农业开发有限公司 绍兴 312000 |
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| 基金项目： | 鲆鲽类现代产业技术体系(CARS-50)、山东省自然科学基金项目(ZR2012CQ025)、中央级公益性事业单位基本科研业务费项目(20603022012022)和绍兴市院校科技合作项目(2012704)共同资助 |
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| 摘 要： | 为在蛋白水平认识半滑舌鳎类胰岛素生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)的生理功能，将IGF-Ⅱ成熟肽序列克隆到原核表达载体pET-28a中，成功构建了重组半滑舌鳎IGF-Ⅱ/pET28a质粒，导入到E. coli BL21(DE3)菌株后经IPTG诱导，获得了大小为11.4 kDa的重组IGF-Ⅱ蛋白，N端含6个组氨酸，可特异性地被6×His抗体识别。重组IGF-Ⅱ蛋白在最优诱导条件37℃诱导2 h，目的蛋白表达量占重组表达菌总蛋白的43.7%，重组蛋白主要以包涵体存在。将获得的重组蛋白包涵体经变性、纯化和复性后，获得了纯化的IGF-Ⅱ重组蛋白，其可在体外显著促进人乳腺癌MDA231细胞的增殖，表明IGF-Ⅱ重组蛋白具有体外细胞水平的生物活性。本研究结果可为认识鱼类IGF-Ⅱ生理功能及半滑舌鳎生长调控机制提供理论支撑。
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| 关 键 词： | 半滑舌鳎 IGF-Ⅱ 原核表达 生物活性 |
| 收稿时间： | 2014/4/16 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2014/6/17 0:00:00 |
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