牙鲆dazl基因的克隆与表达分析 |
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引用本文: | 孙近近,张俊玲,孙文慧,施志仪.牙鲆dazl基因的克隆与表达分析[J].海洋渔业,2016(4):391-399. |
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作者姓名: | 孙近近 张俊玲 孙文慧 施志仪 |
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作者单位: | 上海海洋大学水产与生命学院,农业部淡水水产种质资源重点实验室,上海201306 |
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基金项目: | 国家自然科学基金青年项目(41306128),国家自然科学基金面上项目(30271017) |
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摘 要: | dazl(deleted in azoospermia-like)基因是多种物种精子发生的重要调控因子,为探讨该基因在牙鲆(Paralichthys olivaceus)性腺发育分化中的作用,本研究采用同源克隆和RACE技术克隆了牙鲆dazl基因的cDNA序列,利用生物信息学方法分析了其序列结构,并利用实时荧光定量PCR技术检测了该基因在牙鲆成体组织和早期发育阶段的表达情况。结果发现:牙鲆dazl cDNA序列全长2 031 bp,包括105 bp的5'端非翻译区,1 275 bp的3'端非翻译区和编码217个氨基酸残基的651 bp开放阅读框;氨基酸同源序列比对显示该序列存在一个高度保守的RRM(RNA recognition motif)结构域,且该结构域在鱼类中具有100%的序列一致性;荧光定量PCR结果显示dazl基因主要在牙鲆性腺中表达,且在精巢中的表达高于卵巢;在牙鲆早期发育阶段,dazl基因在未受精卵、受精卵及囊胚期均有较高的转录本,而在原肠胚期表达开始降低,至孵化后3 d一直保持较低的水平,这些丰富表达的母源性dazl mRNA可能参与了胚胎发育中原始生殖细胞的形成。本研究为进一步阐明dazl基因在牙鲆生殖发育中的功能奠定了基础。
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关 键 词: | 牙鲆 dazl cDNA克隆 基因表达 |
Molecular cloning and expression analysis of dazl gene in Paralichthys olivaceus |
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Abstract: | |
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Keywords: | Paralichthys olivaceus dazl cDNA cloning gene expression |
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