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中华绒螯蟹细胞色素CYP2基因的克隆与表达分析
引用本文:蒲红双,侯红漫,高祥刚,赫崇波,张公亮,许艺迪,鲍相渤,刘卫东.中华绒螯蟹细胞色素CYP2基因的克隆与表达分析[J].水产科学,2017(2):153-159.
作者姓名:蒲红双  侯红漫  高祥刚  赫崇波  张公亮  许艺迪  鲍相渤  刘卫东
作者单位:1. 大连工业大学 食品学院,辽宁 大连 116034;辽宁省海洋水产科学研究院,辽宁省海洋水产分子生物学重点实验室,辽宁 大连 116023;2. 大连工业大学 食品学院,辽宁 大连,116034;3. 辽宁省海洋水产科学研究院,辽宁省海洋水产分子生物学重点实验室,辽宁 大连 116023
基金项目:国家自然科学基金资助项目(31302178),辽宁省科学事业公益研究基金资助项目(2016004005)
摘    要:为研究细胞色素CYP2基因在中华绒螯蟹蜕皮及生长发育中的作用,本试验通过逆转录聚合酶链式RT-PCR反应以及cDNA末端快速扩增RACE技术获得了中华绒螯蟹CYP2基因cDNA全长。用实时荧光定量PCR技术,分析该基因在中华绒螯蟹蜕皮过程中各组织的相对表达量。试验结果显示,中华绒螯蟹CYP2的cDNA全长1772bp,编码491个氨基酸序列,包括一个84bp的5′端非编码区,一个212bp的3′端非编码区、一个1475bp的开放阅读框,经BLAST比对,该核苷酸序列与岸蟹、三疣梭子蟹的相似性分别为66%、64%。实时荧光定量PCR结果显示,中华绒螯蟹蜕皮前,CYP2基因在鳃中的表达量相对最高;在肝胰脏、肌肉中表达量略低于鳃;在Y器官、眼柄、胸神经节、脑神经节、肠中少量表达;在心和胃中表达量最低。中华绒螯蟹在不同的蜕皮时期中,通过荧光定量试验得出,肝胰脏中CYP2基因表达量在蜕皮前期和蜕皮期最高;眼柄中CYP2基因表达量从蜕皮期到蜕皮后期有上升趋势;鳃中CYP2基因表达量在蜕皮前期最高;Y器官、脑神经节和肠中CYP2基因表达量在蜕皮期最高;肌肉中CYP2基因表达量在蜕皮前期最高;胸神经节和胃中CYP2基因表达量在蜕皮后期最高;Y器官中CYP2基因在蜕皮前期表达量高于蜕皮后期和蜕皮期。以上试验结果表明,CYP2对中华绒螯蟹蜕皮生长中的调控可能起到重要作用。

关 键 词:中华绒螯蟹  CYP2  蜕皮  基因克隆

cDNA Cloning and Expression Analysis of CYP2 Gene in Chinese Mitten Crab Eriocheir sinensis
PU Hongshuang,HOU Hongman,GAO Xianggang,HE Chongbo,ZHANG Gongliang,XU Yidi,BAO Xiangbo,LIU Weidong.cDNA Cloning and Expression Analysis of CYP2 Gene in Chinese Mitten Crab Eriocheir sinensis[J].Fisheries Science,2017(2):153-159.
Authors:PU Hongshuang  HOU Hongman  GAO Xianggang  HE Chongbo  ZHANG Gongliang  XU Yidi  BAO Xiangbo  LIU Weidong
Abstract:
Keywords:Eriocheir sinensis  CYP2  molting  gene cloning
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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