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栉孔扇贝精子膜蛋白的提取分离及初步鉴定
引用本文:刘丽燕,杨爱国,王清印,周丽青,刘志鸿.栉孔扇贝精子膜蛋白的提取分离及初步鉴定[J].海洋水产研究,2008,29(2):73-81.
作者姓名:刘丽燕  杨爱国  王清印  周丽青  刘志鸿
作者单位:1. 农业部海洋渔业资源可持续利用重点实验室,中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛,266071;上海水产大学生命学院,200090
2. 农业部海洋渔业资源可持续利用重点实验室,中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛,266071
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划) , 国家科技攻关项目
摘    要:通过SDS-PAGE电泳,从提取液的倍数、提取时间、Triton X-100的浓度、SDS的有无等4个方面对提取条件进行优化,确定栉孔扇贝精子膜蛋白的最佳提取条件是:将精液150g离心去除精原细胞,0·1mol/L PBS缓冲液清洗两次,0·1mol/L Tris-HCl缓冲液清洗两次,3000g离心10min(4℃)得精子悬液;然后向精子悬液中加入3倍体积含1%Triton X-100和0.1%SDS的膜蛋白提取液中冰浴振摇1·5h;4℃,50000g离心15min,收集上清精子膜蛋白溶液。SDS-PAGE电泳后,考马斯亮蓝R-250染色检测出22种膜蛋白,分子量在23~156kDa之间,PAS染色检测出糖蛋白有13种,苏丹黑B染色检测出脂蛋白有12种,其中既为糖蛋白又为脂蛋白的有8种。此研究结果可为以后进一步分离纯化栉孔扇贝的精子膜蛋白,研究其在精子发生和受精过程中的功能及作用提供基础资料。

关 键 词:栉孔扇贝  精子膜蛋白  糖蛋白  脂蛋白
文章编号:1000-7075(2008)02-0073-09
修稿时间:2007年3月21日

Extraction and primary identification of sperm membrane protein from Chlamys farreri
LIU Li-yan,YANG Ai-guo,WANG Qing-yin,ZHOU Li-qing,LIU Zhi-hong.Extraction and primary identification of sperm membrane protein from Chlamys farreri[J].Marine Fisheries Research,2008,29(2):73-81.
Authors:LIU Li-yan  YANG Ai-guo  WANG Qing-yin  ZHOU Li-qing  LIU Zhi-hong
Abstract:
Keywords:Chlamys farreri Sperm membrane protein GlycoproteinLipoprotein
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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