| 施氏鲟下丘脑神经肽基因的克隆、序列分析及表达特征 |
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| 引用本文： | 高雪,吕伟华,王红伟,张颖.施氏鲟下丘脑神经肽基因的克隆、序列分析及表达特征[J].中国水产科学,2020,27(5):504-515. |
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| 作者姓名： | 高雪 吕伟华 王红伟 张颖 |
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| 作者单位： | 1. 上海海洋大学, 农业农村部淡水水产种质资源重点实验室, 上海 201306;2. 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所, 黑龙江 哈尔滨 150070;3. 上海海洋大学, 水产科学国家级实验教学示范中心, 上海 201306;4. 中国水产科学研究院鲟鱼繁育工程中心, 北京 102400 |
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| 基金项目： | 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目（HSY201609）. |
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| 摘 要： | 为了解下丘脑神经肽(kisspeptin)在施氏鲟(Acipenser schrenckii)生殖调控中的作用,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和RACE技术首次克隆得到施氏鲟2个kisspeptin基因的全长cDNA序列,命名为kiss1和kiss2,并对它们编码氨基酸序列的特征及时空表达模式进行分析。结果表明,施氏鲟kiss1基因的cDNA全长为522 bp,编码130个氨基酸;kiss2基因的cDNA全长为518bp,编码149个氨基酸;Kiss1和Kiss2均以α-螺旋和无规则蜷曲为二级结构中的主要元件,且为含有信号肽、无跨膜结构、分泌到细胞外的不稳定亲水性蛋白质。氨基酸序列比对及进化分析表明,施氏鲟Kiss1和Kiss2具有高度保守区域,与达氏鲟(Acipenser dabryanus)Kiss1和Kiss2蛋白序列一致性最高,亲缘关系最近。荧光定量PCR结果显示,施氏鲟kiss1和kiss2的表达具有组织特异性,其中kiss1在性腺中的表达量最高,而kiss2在脑中的表达量最高。kiss2在早期性腺发育过程中的表达量检测显示,在孵化后0～49 d, kiss2的表达量较低,而kiss1的表达量则较高,在孵化后21 d达峰值;随着性腺的发育(孵化后64～199 d), kiss2的表达水平逐渐升高并在139 d达到最高,随后下降;与kiss2表达模式不同, kiss1的表达量在孵化后184 d达到峰值。以上结果表明, kisspeptin基因在施氏鲟早期性腺发育过程中具有重要的作用,且其调控功能存在差异。本实验为进一步阐明kiss1和kiss2的生理功能和分子调控机制奠定了理论基础。
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| 关 键 词： | 施氏鲟 基因克隆 序列分析 基因表达 |
Cloning, sequence analysis, and expression characterization of the kisspeptin gene from Acipenser schrenckii |
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| GAO Xue,LYU Weihu,WANG Hongwei,ZHANG Ying.Cloning, sequence analysis, and expression characterization of the kisspeptin gene from Acipenser schrenckii[J].Journal of Fishery Sciences of China,2020,27(5):504-515. |
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| Authors: | GAO Xue LYU Weihu WANG Hongwei ZHANG Ying |
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| Institution: | 1. Key Laboratory of Freshwater Fishery Germplasm Resource, Ministry of Agriculture and Rural Affairs;Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China;2. Heilongjiang River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Harbin 150070, China;3. National Demonstration Center for Experimental Fisheries Science Education, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China;4. Sturgeon Breeding Engineering Center, Chinese Academy of Fishery Sciences, Beijing 102400, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | , kisspeptin, gene clone, sequence analysis, gene expression |
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