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| 近江牡蛎热休克蛋白 70 基因的原核表达研究 | |
| 引用本文： | 李薇,张其中,张占会,崔淼,姚占娟,何毛贤.近江牡蛎热休克蛋白 70 基因的原核表达研究[J].中国水产科学,2010,17(3):424-430. |
| 作者姓名： | 李薇 张其中 张占会 崔淼 姚占娟 何毛贤 |
| 作者单位： | 1. 暨南大学,水生生物研究所,热带亚热带水生态工程教育部工程研究中心,广东省高校水体富营养化与赤潮防治重点实验室,广东,广州,510632 2. 暨南大学,水生生物研究所,热带亚热带水生态工程教育部工程研究中心,广东省高校水体富营养化与赤潮防治重点实验室,广东,广州,510632;中国科学院,南海海洋研究所,广东,广州,510301 3. 中国科学院,南海海洋研究所,广东,广州,510301 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，广东省自然科学基金，中国博士后科学基金一等资助金，中国科学院海洋生物资源可持续利用重点实验室(LMB)、广东省应用生物学重点实验室(LAMB)和广东省海洋药物重点实验室(LMM)联合开放课题 |
| 摘 要： | 近江牡蛎(Crassostrea hongkongensis)热休克蛋白70(HSP70)家族成员是重要的抗逆和潜在污染预警分子。本研究将近江牡蛎HSP70基因cDNA连接到原核表达载体pQE30中,构建近江牡蛎HSP70的重组表达质粒pQE30/HSP70。该重组质粒经酶切和测序鉴定后,转入表达宿主大肠杆菌M15进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳和Westernblot分析表明,确实获得了重组蛋白的表达。分别在25℃、30℃和37℃下,经0.2mmol/LIPTG诱导融合蛋白表达,其中,在25℃下,诱导的融合蛋白表达量最高,表明该温度为恰当诱导温度;在25℃下,分别诱导重组蛋白表达2h、4h、6h、8h、12h和16h,其中诱导12h的蛋白表达量最高;大部分融合蛋白以可溶形式存在于大肠杆菌M15中;表达的重组融合蛋白分子量约69kD,并能与鼠源抗6伊His的单克隆抗体特异性结合,表明通过原核表达获得了近江牡蛎HSP70蛋白。实验表明,在25℃下,经0.2mmol/LIPTG诱导表达12h,可获得大量可溶近江牡蛎HSP70蛋白。 |
| 关 键 词： | 热休克蛋白70 原核表达 近江牡蛎 |
| 修稿时间： | 2010/6/10 0:00:00 |
Prokaryotic expression of heat shock protein 70 gene in Crassostrea hongkongensis |
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| LI Wei,ZHANG Qizhong,ZHANG Zhanhui,CUI Miao,YAO Zhanjuan,HE Maoxian.Prokaryotic expression of heat shock protein 70 gene in Crassostrea hongkongensis[J].Journal of Fishery Sciences of China,2010,17(3):424-430. | |
| Authors: | LI Wei ZHANG Qizhong ZHANG Zhanhui CUI Miao YAO Zhanjuan HE Maoxian |
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| Keywords: | |
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