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团头鲂促性腺激素GtHⅡβ 亚基基因5′端启动子区克隆及表达载体构建
引用本文:曲宪成,崔严慧,周正峰,曲学伟,金一春,胡萍华,尚晓莉,程翠,张开岳,张勇,蒋骄云.团头鲂促性腺激素GtHⅡβ 亚基基因5′端启动子区克隆及表达载体构建[J].中国水产科学,2010,17(4):649-658.
作者姓名:曲宪成  崔严慧  周正峰  曲学伟  金一春  胡萍华  尚晓莉  程翠  张开岳  张勇  蒋骄云
作者单位:1. 上海海洋大学,水产与生命学院,上海,201306
2. 烟台市牟平区渔业技术服务中心,山东,烟台,264100
基金项目:上海市重点学科建设项目 
摘    要:利用改进的锚定PCR方法克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)促性腺激素Ⅱβ(GtHⅡβ)亚基基因5′端侧翼序列,并在生物信息学方法分析的基础上构建了荧光素酶质粒表达载体。序列分析结果显示:克隆得到的GtHⅡβ亚基基因5′端侧翼序列长度为1354bp,其中包括TATA盒、ERE、ARE、PRE、GRE、LHX3、SF-1、Sp1、Pit-1、NF-Y和AP1等可能对GtHⅡβ亚基基因转录调控起重要作用的功能转录因子结合位点;转录起始位点位于-40~10bp。进一步利用PCR方法扩增得到了811bp(-771~+40bp)、601bp(-561~+40bp)、386bp(-346~+40bp)、239bp(-199~+40bp)和98bp(-58~+40bp)的5个缺失片段,并同全长片段一起分别连接至pGL3-Basic报告基因载体,成功构建了团头鲂GtHⅡβ亚基基因5′端侧翼序列的表达载体,为进一步研究、分析其转录调控机制提供了基础依据。

关 键 词:团头鲂  促性腺激素Ⅱβ亚基  5'侧翼序列  启动子  表达载体
修稿时间:2010/7/27 0:00:00

Molecular cloning and construction of expression vector of 5' flanking region in Megalobrama amblycephala gonadotropin Ⅱβ-subunit gene
QU Xiancheng,CUI Yanhui,ZHOU Zhengfeng,QU Xuewei,JIN Yichun,HU Pinghua,SHANG Xiaoli,CHENG Cui,ZHANG Kaiyue,ZHANG Yong,JIANG Jiaoyun.Molecular cloning and construction of expression vector of 5' flanking region in Megalobrama amblycephala gonadotropin Ⅱβ-subunit gene[J].Journal of Fishery Sciences of China,2010,17(4):649-658.
Authors:QU Xiancheng  CUI Yanhui  ZHOU Zhengfeng  QU Xuewei  JIN Yichun  HU Pinghua  SHANG Xiaoli  CHENG Cui  ZHANG Kaiyue  ZHANG Yong  JIANG Jiaoyun
Abstract:
Keywords:
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