| 重大检疫性害虫玉米根萤叶甲的种特异性SS-COⅠ快速检测技术研究 |
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| 引用本文： | 张桂芬,王玉生,郭建洋,冼晓青,万方浩,张金良,王福莲,张亚宁.重大检疫性害虫玉米根萤叶甲的种特异性SS-COⅠ快速检测技术研究[J].植物保护,2019,45(1):109-115. |
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| 作者姓名： | 张桂芬 王玉生 郭建洋 冼晓青 万方浩 张金良 王福莲 张亚宁 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院植物保护研究所, 植物病虫害生物学国家重点实验室, 北京 100193; 2. 农业部外来入侵生物预防与控制研究中心, 北京 100193; 3. 北京市植物保护站, 北京 100029; 4. 长江大学农学院, 荆州 434100 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划(2017YFC1200600, 2016YFC1201200); 农业部“948”项目(2016-X48) |
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| 摘 要： | 玉米根萤叶甲在欧洲和美国是一种严重为害玉米的入侵性害虫,传播速度快,侵入我国的可能性极高。本文针对其难以快速准确进行形态鉴别的问题,以玉米根萤叶甲为研究对象,以其他9种/生物型叶甲总科常见害虫为参照,采用基于COⅠ基因的种特异性PCR方法(species-specific COⅠ, SS-COⅠ),研究其快速分子检测鉴定技术。通过提取10种/生物型叶甲DNA和通用型引物扩增测序,获得其基因片段的碱基序列,并比对分析设计1对玉米根萤叶甲特异性引物(DvvZCE1/DvvZCF1),其扩增片段为462 bp。种特异性检验结果显示,该对引物只对玉米根萤叶甲的COⅠ基因具有扩增能力,对其他常见叶甲类害虫,包括玉米双斑长跗萤叶甲、榆黄毛萤叶甲、黄曲条跳甲、油菜蚤跳甲、黄点直缘跳甲、莲草直胸跳甲、枸杞负泥虫以及褐足角胸叶甲的棕黄型和蓝绿型没有扩增能力,该对引物不仅对成虫有很好的扩增效果,对单粒卵、2龄幼虫以及成虫残体(包括触角、头部、胸部、腹部、前足、后足)也具有同样的扩增效果,其最低检出阈值为102.73 pg/μL(相当于1/122 880头雌性成虫)。玉米根萤叶甲特异性SS-COⅠ检测技术在其口岸检疫,以及有效阻截中具有重要意义。
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| 关 键 词： | 玉米根萤叶甲 SS-COⅠ标记 种特异性引物 快速鉴定 分子检测 |
| 收稿时间： | 2018/1/18 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2018/3/12 0:00:00 |
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