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葡萄霜霉病菌PCR检测方法的建立与应用
引用本文:秦文韬,黄晓庆,孔繁芳,王忠跃,张昊.葡萄霜霉病菌PCR检测方法的建立与应用[J].植物保护,2014,40(2):99-102.
作者姓名:秦文韬  黄晓庆  孔繁芳  王忠跃  张昊
作者单位:中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京100193
摘    要:通过对已测序和已报道的葡萄霜霉病菌[Plasmopara viticola (Berk et Curtis) Ber.et de Toni]细胞色素c氧化酶亚型2(cytochrome c oxidase Ⅱ,cox2)的基因序列进行同源性比对分析,设计合成了一对用于P.viticola的检测引物F Pv/R Pv。利用该引物对包括P.viticola在内的30种常见植物病原真菌(包括15种Plasmopara属真菌、8种葡萄常见致病菌)的基因组DNA进行了PCR扩增,验证引物F Pv/R Pv的特异性,结果表明:该引物特异性强,仅P.viticola基因组DNA作为模板的PCR扩增产物呈现一条600 bp左右的特异性条带,其他参照菌株及阴性对照均无任何条带;灵敏度验证结果表明,该检测法可以检测出3.3 pg/μL 水平的P.viticola基因组DNA;应用该方法对来自全国不同葡萄产区的不同品种的78份葡萄霜霉病菌进行了检测,结果表明,该检测法适用范围广,且检测准确率达100%。

关 键 词:葡萄霜霉病菌  cox2  聚合酶链式反应  检测

Establishment and application of PCR for detection of Plasmopara viticola
Qin Wentao,Huang Xiaoqing,Kong Fanfang,Wang Zhongyue,Zhang Hao.Establishment and application of PCR for detection of Plasmopara viticola[J].Plant Protection,2014,40(2):99-102.
Authors:Qin Wentao  Huang Xiaoqing  Kong Fanfang  Wang Zhongyue  Zhang Hao
Institution:State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing100193, China
Abstract:
Keywords:Plasmopara viticola  cox2  PCR  detection
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