| 家蚕G蛋白γ1亚基(BmGγ1)的克隆及其谷胱甘肽硫转移酶融合蛋白的表达与纯化 |
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| 引用本文： | 章玉萍,蒋剑豪,赵云坡,樊美珍,黄勇平,苗雪霞.家蚕G蛋白γ1亚基(BmGγ1)的克隆及其谷胱甘肽硫转移酶融合蛋白的表达与纯化[J].蚕业科学,2008,34(4). |
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| 作者姓名： | 章玉萍 蒋剑豪 赵云坡 樊美珍 黄勇平 苗雪霞 |
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| 作者单位： | 安徽农业大学林学与园林学院微生物防治重点实验室,合肥,230036;中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所,上海,200032 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 异三元G蛋白是真核细胞感知外界信号后将信号传递到胞内的重要分子,参与生物体广泛的信号转导。为了研究家蚕体内G蛋白的生理功能及其作用机制,运用生物信息学方法预测了家蚕G蛋白γ1亚基(Gγ1)的序列,设计引物验证预测序列后,克隆了家蚕Gγ1的序列,再通过酶切克隆至表达载体pET-41b(+)后,导入E.coliBL21宿主菌中,经异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组谷胱甘肽硫转移酶(glutathione s-transferase,GST)融合蛋白,并亲和层析纯化表达产物。家蚕Gγ1重组GST融合蛋白经SDS-PAGE电泳和Western blot分析,在分子质量约36 kD处出现特异性蛋白条带,重组蛋白经GST亲和层析柱纯化后,得到了高纯度的融合蛋白,说明已经成功克隆到家蚕Gγ1基因,并在E.coliBL21中高效表达。
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| 关 键 词： | G蛋白 γ1-亚基 家蚕 克隆 基因表达 |
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