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NF-κB信号通路调控布鲁氏菌胞内存活分子机制的初步研究
引用本文:易继海,张俊波,李爽,王熙楚,张辉,陈创夫.NF-κB信号通路调控布鲁氏菌胞内存活分子机制的初步研究[J].中国畜牧兽医,2016,43(3):592-600.
作者姓名:易继海  张俊波  李爽  王熙楚  张辉  陈创夫
作者单位:1. 石河子大学动物科技学院, 石河子 832000;2. 铜仁学院生物与农林工程学院, 铜仁 554300
基金项目:科技部国家科技重大专项(1104602);国家自然科学基金(31502067)
摘    要:本试验用布鲁氏菌强、弱毒株侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7,旨在探讨NF-κB信号通路与布鲁氏菌强、弱毒株在胞内生存的关系。采用光滑型牛布鲁氏菌2308、粗糙型牛布鲁氏菌RB51在不同感染复数下侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7,侵染0、4、8、24 h后,裂解细胞收集蛋白,Western blotting检测布鲁氏菌对激活NF-κB信号通路的影响。利用不同浓度的NF-κB信号通路抑制剂处理小鼠巨噬细胞RAW264.7,然后用布鲁氏菌在不同感染复数下侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7,ELISA试剂盒检测细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达量;同时对胞内菌CFU进行计数。结果显示粗糙型牛布鲁氏菌RB51可以强烈激活NF-κB信号通路,光滑型牛布鲁氏菌2308对其激活作用较弱;同时对NF-κB信号通路的激活具有浓度依赖性,在感染复数为80:1、侵染时间为8 h时光滑型牛布鲁氏菌2308和粗糙型牛布鲁氏菌RB51对NF-κB激活程度最强,且该通路参与产生TNF-α、IL-1β和IL-6;NF-κB信号通路抑制剂BAY11-7082影响布鲁氏菌在胞内的生存。因此,粗糙型牛布鲁氏菌RB51胞内存活与NF-κB信号通路密切相关,为进一步研究布鲁氏菌的胞内致病机制奠定基础,也为布鲁氏菌新型药物的研发、家畜布鲁氏菌病预防和治疗提供科学依据。

关 键 词:布鲁氏菌2308  布鲁氏菌RB51  巨噬细胞  NF-κB信号通路  胞内存活  
收稿时间:2015-09-08
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