| 猫细小病毒洛阳分离株VP2蛋白原核表达及多克隆抗体制备 |
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| 引用本文： | 王文婕,茹鹏辉,郁川,杜付熙,陈松彪,尚珂,张春杰,程相朝.猫细小病毒洛阳分离株VP2蛋白原核表达及多克隆抗体制备[J].中国畜牧兽医,2023(4):1511-1521. |
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| 作者姓名： | 王文婕 茹鹏辉 郁川 杜付熙 陈松彪 尚珂 张春杰 程相朝 |
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| 作者单位： | 河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室 |
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| 基金项目： | 河南省自然科学基金项目(232300421263)； |
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| 摘 要： | 【目的】研究旨在对猫细小病毒(Feline panleukopenia virus, FPV)洛阳分离株VP2蛋白进行原核表达和鼠源多克隆抗体制备。【方法】根据已公布的FPV VP2基因序列(GenBank登录号：EU018143.1)设计1对特异性引物，以洛阳地区7例疑似FPV感染猫粪便为样本提取DNA,对VP2基因进行PCR鉴定及测序，利用Mega 11.0软件对VP2基因进行遗传进化分析；应用在线软件预测分离株VP2蛋白结构特征并找出优势抗原表位，克隆VP2优势抗原(sVP2)并连接pET-32a(+)载体，构建pET-32a-sVP2重组质粒，转化大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞后进行诱导表达，对重组蛋白表达条件进行优化，并使用SDS-PAGE与Western blotting方法进行鉴定；将pET-32a-sVP2用镍柱亲和层析蛋白纯化后免疫BABL/c小鼠，制备多克隆抗体，采用ELISA法检测抗体效价。【结果】分离得到1株FPV,命名为LY-1。遗传进化分析发现，该毒株属于FPV-G2亚群，与北京株(GenBank登录号：MT270581)亲缘关系最近。生物信息学...
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| 关 键 词： | 猫细小病毒(FPV) 洛阳分离株 VP2基因 原核表达 多克隆抗体 |
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