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大白猪CDO1基因克隆、生物信息学分析及组织表达定位
引用本文:刘红润,朱思燃,奉玲丽,张坤,颜港,王钰滨,张帅,江山,许迪,兰干球,梁晶.大白猪CDO1基因克隆、生物信息学分析及组织表达定位[J].中国畜牧兽医,2023(4):1352-1363.
作者姓名:刘红润  朱思燃  奉玲丽  张坤  颜港  王钰滨  张帅  江山  许迪  兰干球  梁晶
作者单位:广西大学动物科学技术学院
基金项目:国家现代农业产业技术体系(nycytxgxcxtd-15-01);;国家自然科学基金(81860150);
摘    要:【目的】克隆大白猪半胱氨酸双加氧酶1(cysteine dioxygenase type 1,CDO1)基因并进行生物信息学分析,检测CDO1基因在大白猪不同组织中的表达情况,并定位CDO1在乳腺中的位置,为进一步探究CDO1基因在乳腺发育过程中的调控作用提供依据。【方法】通过PCR扩增大白猪CDO1基因CDS全长序列,将CDO1基因序列与pMD18-T载体连接后转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,挑取单个阳性菌扩增培养,菌液通过PCR鉴定后测序,对测序结果进行不同物种间序列相似性比对及系统进化树构建;利用在线预测软件对CDO1蛋白进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR检测CDO1基因在大白猪不同组织中的表达水平;利用免疫组化方法检测CDO1蛋白在母猪乳腺中的定位。【结果】大白猪CDO1基因CDS区序列全长603 bp,编码200个氨基酸,家猪与大白猪CDO1基因核苷酸序列相似性最高。系统进化树结果显示,大白猪与家猪先聚为一类,且与猕猴亲缘关系较近。CDO1蛋白的分子质量为23.018 ku,等电点为5.98,不稳定系数为33.58(<40),为稳定亲水性蛋白,定位在胞浆内,存在...

关 键 词:大白猪  CDO1基因  克隆  表达  定位
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