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抗菌肽Temprine-La(FS)抑制2型猪链球菌生物被膜形成的研究
引用本文:张欣,潘晨浩,赵瑞利,姜轩,金天明,赵洋,马吉飞,于恩远,李留安,张振洲,李桂霞,李瑞忠.抗菌肽Temprine-La(FS)抑制2型猪链球菌生物被膜形成的研究[J].中国畜牧兽医,2021,48(1):324-337.
作者姓名:张欣  潘晨浩  赵瑞利  姜轩  金天明  赵洋  马吉飞  于恩远  李留安  张振洲  李桂霞  李瑞忠
作者单位:1. 天津农学院动物科学与动物医学学院, 天津 300384;2. 石家庄飞龙饲料有限公司, 石家庄 050073
基金项目:天津市应用基础与前沿技术研究计划一般项目(18JCYBJC30100、14JCYBJC30000);天津市高校"中青年骨干创新人才"培养计划;天津市"131"创新型人才培养计划;姬松茸多糖的高效提取技术研究及应用(石家庄市科学技术局196500407A)
摘    要:试验旨在研究抗菌肽Temprine-La(S)(T-La(S))、Temprine-La(FS)(T-La(FS))、RGD-T-La(S)和RGD-T-La(FS)对2型猪链球菌(SS2)生物被膜形成的抑制作用。通过结晶紫染色法(CV)检测SS2生物被膜形成能力;微量稀释法测定抗菌肽对SS2生物被膜的最小生物被膜抑菌浓度(MBIC)和最小生物被膜杀菌浓度(MBEC);结晶紫染色法和扫描电镜(SEM)检测抗菌肽对SS2生物被膜形成的影响;XTT法检测抗菌肽对SS2生物被膜代谢活性的影响;苯酚硫酸法检测抗菌肽对SS2生物被膜胞外多糖含量的影响;建立猪链球菌-斑马鱼感染模型,HE染色法观察T-La(FS)对斑马鱼脑组织病理变化的影响;实时荧光定量PCR法分析抗菌肽对SS2生物被膜相关基因及对斑马鱼炎性细胞因子基因转录水平的影响。结果显示,SS2具有良好的生物被膜形成能力;T-La(S)、RGD-T-La(S)、T-La(FS)和RGD-T-La(FS)对SS2生物被膜的MBIC分别为31.3、15.6、7.8和15.6 μg/mL;MBEC分别为62.6、31.2、15.6和31.2 μg/mL;结晶紫染色结果表明,抗菌肽对SS2生物被膜的形成有抑制作用;扫描电镜结果显示,抗菌肽使SS2生物被膜中的细菌数量和生物被膜的形态发生明显变化,细胞外基质大量减少;XTT法结果显示,抗菌肽可显著降低SS2生物被膜的代谢活性;苯酚硫酸法结果显示,抗菌肽能有效抑制SS2生物被膜合成胞外多糖;实时荧光定量PCR结果表明,抗菌肽作用后降低了SS2生物被膜基因的转录水平;T-La(FS)作用后TLR2、MyD88及促炎性细胞因子基因的转录水平显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01),抗炎性细胞因子基因的转录水平显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01)。抗菌肽主要通过影响生物被膜相关基因转录水平和阻断胞外多糖的合成与分泌来抑制SS2生物被膜的形成,其中T-La(FS)可能通过抑制TLR2信号通路中TLR2和MyD88分子表达,抑制炎性细胞因子的释放,减轻脑膜炎的炎性反应。

关 键 词:抗菌肽Temprine-La(FS)  2型猪链球菌  生物被膜  斑马鱼  TLR2  MyD88  
收稿时间:2020-06-28

Inhibitory Effect of Antimicrobial Peptide Temprine-La(FS) on Biofilm Formation of Streptococcus suis Type 2
ZHANG Xin,PAN Chenhao,ZHAO Ruili,JIANG Xuan,JIN Tianming,ZHAO Yang,MA Jifei,YU Enyuan,LI Liuan,ZHANG Zhenzhou,LI Guixia,LI Ruizhong.Inhibitory Effect of Antimicrobial Peptide Temprine-La(FS) on Biofilm Formation of Streptococcus suis Type 2[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2021,48(1):324-337.
Authors:ZHANG Xin  PAN Chenhao  ZHAO Ruili  JIANG Xuan  JIN Tianming  ZHAO Yang  MA Jifei  YU Enyuan  LI Liuan  ZHANG Zhenzhou  LI Guixia  LI Ruizhong
Institution:1. College of Animal Science and Veterinary Medicine, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China;2. Shijiazhuang Feilong Feed Co., Ltd., Shijiazhuang 050073, China
Abstract:
Keywords:antimicrobial peptide Temprine-La(FS)  Streptococcus suis type 2  biofilm  zebrafish  TLR2  MyD88  
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