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猪源E.coli HPI通过NLRP3/ASC/Caspase-1诱导巨噬细胞焦亡的机制
引用本文:沈珏,邓静,王浩,肖金龙,万全,张博,赵维薇,赵汝,肖鹏,高洪.猪源E.coli HPI通过NLRP3/ASC/Caspase-1诱导巨噬细胞焦亡的机制[J].中国兽医学报,2024(3):450-457.
作者姓名:沈珏  邓静  王浩  肖金龙  万全  张博  赵维薇  赵汝  肖鹏  高洪
作者单位:1. 云南农业大学动物医学学院;2. 云南农业大学食品科学技术学院;3. 云南农业大学动物科学技术学院
基金项目:国家自然科学基金资助项目(31960692,31660704);
摘    要:为探讨猪源E.coli高致病性毒力岛(high pathogenicity island, HPI)对巨噬细胞焦亡的影响,以内毒素(LPS)联合三磷酸腺苷(ATP)建立焦亡阳性对照,使用E.coli WT株(E.coli HPI+)和前期构建的E.coli HPI敲除株(E.coliΔHPI)感染巨噬细胞,在感染后不同时间点收集细胞,运用PI染色观察细胞膜损伤情况;RT-qPCR测定NLRP3/ASC/Caspase-1焦亡通路中关键因子的mRNA水平;共聚焦观察NLRP3和Caspase-1的炎性复合体的组装;Western blot技术测定GSDMD和cleaved-GSDMD的表达。结果显示,与E.coliΔHPI组相比,E.coli HPI+焦亡通路关键因子NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD及炎症因子IL-18、IL-1β的mRNA水平均升高;NLRP3和Caspase-1蛋白的表达量升高,共聚焦观察到共定位;E.coli HPI+组的GSDMD及其活性形式cleaved-GSDMD的表达水平高于...

关 键 词:大肠杆菌  高致病性毒力岛  巨噬细胞  细胞焦亡  NLRP3/ASC/Caspase-1通路
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