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鸡痘病毒通用高效表达载体的构建及其初步应用
引用本文:孙蕾,吴艳涛,张体银,陈素娟,刘秀梵.鸡痘病毒通用高效表达载体的构建及其初步应用[J].中国兽医学报,2004,24(5):429-432.
作者姓名:孙蕾  吴艳涛  张体银  陈素娟  刘秀梵
作者单位:扬州大学,农业部畜禽传染病学重点开放实验室,江苏,扬州,225009
基金项目:国家“8 6 3”计划资助项目 (2 0 0 1 AA2 1 30 41 )
摘    要:利用分子克隆技术对本室构建的高效鸡痘病毒表达载体 p1 1 S进行改造 ,在其人工合成禽痘病毒 ( FPV)强启动子 Ps的下游引入含 7个单一酶切位点的多克隆位点 ( MCS) ,构建了便于外源基因插入的通用性更强的高效单表达载体 p N1 1 S。然后将 FPV早晚期启动子 PE/ L 及其启动的鹅源新城疫病毒 NDV ZJ1株的 F基因一并插入 p N1 1 S中 ,使PE/ L 与 Ps反向串联 ,从而构建出 1个含 NDV ZJ1株 F基因的重组 FPV高效双表达载体 p N1 1 SEF,其 MCS可以用于插入其他外源基因。在此基础上 ,将 NDV ZJ1株的 HN基因插入 p N1 1 SEF的 Ps启动子下游的 MCS中 ,构建了共表达 NDV ZJ1株 F和 HN基因的重组 FPV双表达载体 p N1 1 SEFHN。将 p H1 1 SEFHN质粒 DNA与 FPV2 82 E4株共转染 CEF,得到共表达 NDV ZJ1株和 HN基因的重组 FPV,间接免疫荧光实验初步证明外源基因得到了较好的表达。表明所构建的通用高效 FPV表达载体有利于高效基因工程活载体疫苗的研制 ,具有广阔的应用前景

关 键 词:禽痘病毒  高效表达载体  新城疫病毒  F基因  HN基因
文章编号:1005-4545(2004)05-0429-04
修稿时间:2003年6月26日

Construction and Application of Universal and Highly Efficient Expression Vectors of Fowlpox Virus
SUN Lei,WU Yan-tao,ZHANG Ti-yin,CHEN Su-juan,LIU Xiu-fan.Construction and Application of Universal and Highly Efficient Expression Vectors of Fowlpox Virus[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2004,24(5):429-432.
Authors:SUN Lei  WU Yan-tao  ZHANG Ti-yin  CHEN Su-juan  LIU Xiu-fan
Institution:SUN Lei,WU Yan-tao,ZHANG Ti-yin,CHEN Su-juan,LIU Xiu-fan~*
Abstract:
Keywords:fowlpox virus  high-efficiency expression vector  Newcastle disease virus  F gene  HN gene
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