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中国林蛙抗菌肽基因在毕赤酵母中的表达及其活性检测
引用本文:乔红伟,韩俊友,赵瑞利,胡博,谢芳,郑伟,雷连成,江利娜,韩文瑜.中国林蛙抗菌肽基因在毕赤酵母中的表达及其活性检测[J].中国兽医学报,2008,28(6).
作者姓名:乔红伟  韩俊友  赵瑞利  胡博  谢芳  郑伟  雷连成  江利娜  韩文瑜
作者单位:1. 吉林大学畜牧兽医学院,吉林,长春,130062;中国医学科学院实验动物研究所,北京,100021
2. 吉林大学畜牧兽医学院,吉林,长春,130062
3. 吉林省水产科学研究院,吉林,长春,130062
摘    要:将中国林蛙皮肤抗菌肽基因(RC)克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K上,使之准确融合于а交配因子分泌信号,然后通过电击转化毕赤酵母宿主菌GS115/His-,构建pPIC9K/RC。将筛选出的高效表达的重组转化子用甲醇作诱导剂进行小瓶发酵,28~30℃诱导后,经Tricine SDS-PAGE检测,表达产物在а信号因子引导下分泌到培养基中。分泌到培养基中的表达产物能够抑杀细菌和抑制肿瘤细胞生长。对酵母重组子用酵母染色体DNA的通用引物和目的片段的引物进行PCR扩增。结果表明,中国林蛙皮肤抗菌肽基因能以单拷贝整合到毕赤酵母染色体基因组中并形成转录产物。

关 键 词:中国林蛙  抗菌肽  酵母表达  抑菌活性  中国  林蛙  抗菌肽基因  毕赤酵母  高效表达  活性检测  Pichia  pastoris  Rana  chensinensis  gene  peptide  expression  转录  染色体基因组  整合  单拷贝  结果  通用引物  酵母重组子  抑制肿瘤细胞生长  细菌

Cloning and expression of antimicrobial peptide gene from Rana chensinensis in Pichia pastoris
QIAO Hong-wei,HAN Jun-you,ZHAO Rui-li,HU Bo,XIE Fang,ZHENG Wei,LEI Lian-cheng,JIANG Li-na,HAN Wen-yu.Cloning and expression of antimicrobial peptide gene from Rana chensinensis in Pichia pastoris[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2008,28(6).
Authors:QIAO Hong-wei  HAN Jun-you  ZHAO Rui-li  HU Bo  XIE Fang  ZHENG Wei  LEI Lian-cheng  JIANG Li-na  HAN Wen-yu
Abstract:
Keywords:
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