| 牛源犬新孢子虫NcGRA9基因原核表达及免疫原性分析 |
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| 引用本文： | 金卫东,唐泽宇,李作臣,王海军,陈健,贾立军.牛源犬新孢子虫NcGRA9基因原核表达及免疫原性分析[J].中国兽医学报,2023(2):303-306+347. |
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| 作者姓名： | 金卫东 唐泽宇 李作臣 王海军 陈健 贾立军 |
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| 作者单位： | 1. 延边大学东北寒区肉牛科技创新教育部工程研究中心;3. 延边州畜牧总站;4. 延边州动物疫病预防控制中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(32160839)；;高等学校学科创新引智“111”计划资助项目(D20034)； |
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| 摘 要： | 为了确定牛源犬新孢子虫NcGRA9基因的功能及表达蛋白的免疫原性，本试验PCR扩增牛源犬新孢子虫NcGRA9基因，构建克隆质粒pMD18-T-NcGRA9和原核表达质粒pGEX-4T-NcGRA9,转化大肠杆菌BL21感受态细胞中IPTG诱导表达，SDS-PAGE电泳和Western blot分析表达重组蛋白的反应原性，应用重组蛋白与弗氏佐剂混合接种BALB/c小鼠，ELISA检测小鼠血清中IgG、IgG1、IgG2a抗体水平以及IFN-γ、IL-4细胞因子水平。结果显示，经PCR扩增获得522 bp的NcGRA9片段，表达蛋白纯化后相对分子质量约为45 kDa,具有良好的反应原性；重组蛋白接种BALB/c小鼠后，免疫组小鼠IgG、IgG1、IgG2a抗体水平以及IFN-γ、IL-4细胞因子水平均极显著高于PBS对照组(P<0.01),说明表达的重组蛋白具有良好的免疫原性。本试验表达的NcGRA9重组蛋白具有良好的抗原性，为新孢子虫病的防控奠定了基础。
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| 关 键 词： | 犬新孢子虫 NcGRA9 原核表达 重组蛋白 免疫原性 |
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