一种简便快速的体外点突变方法 |
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引用本文: | 扈荣良,李敏,张守峰,邱薇,赵君,王凤阳,涂长春.一种简便快速的体外点突变方法[J].中国兽医学报,2001,21(3):270-270,273. |
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作者姓名: | 扈荣良 李敏 张守峰 邱薇 赵君 王凤阳 涂长春 |
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作者单位: | 解放军军需大学军事兽医研究所, |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(97100109);“九五”军队医药卫生科研基金资助项目 |
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摘 要: | 体外点突变是研究蛋白质结构 -功能关系、基因表达、载体修饰等的重要技术之一。已报道的一些体外突变方法 1~ 4 ] ,一般需以单链 DNA为模板 ,并要求对突变基因进行亚克隆和对单链 DNA拯救 ,技术上较复杂 ,多数需 1周以上时间。Stratagen公司研制的 Quickchange试剂盒 ,可以双链 DNA质粒为模板 ,只需 4步操作 ,在 1~ 2 d内即可完成点突变过程 5] ,但该试剂盒价格昂贵 ,使用次数有限。我们根据 Pfu和 Dpn 等酶的特性 ,自行设计了突变反应及方法 ,对 6kb、8kb和1 4.6kb的目的质粒分别进行了点突变 ,成功地在质粒上创造了相应的酶切…
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关 键 词: | 质粒 碱基突变 体外点突变 酶切位点 |
文章编号: | 1005-4545(2001)03-0270-01 |
Advance in research of bovine spongiform encephalopathy(BSE) |
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Abstract: | |
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