猪支气管败血波氏杆菌外膜蛋白OmpQ基因的克隆表达及多抗血清的制备 |
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引用本文: | 宁建刚,冯娜,肖敏,高翔,温峰琴,包世俊,邢小勇,胡永浩.猪支气管败血波氏杆菌外膜蛋白OmpQ基因的克隆表达及多抗血清的制备[J].中国兽医学报,2018(6). |
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作者姓名: | 宁建刚 冯娜 肖敏 高翔 温峰琴 包世俊 邢小勇 胡永浩 |
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作者单位: | 甘肃农业大学动物医学院 |
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摘 要: | 为研究猪源性支气管败血波氏杆菌外膜蛋白OmpQ的功能及免疫原性,本研究参照GenBank中支气管败血波氏杆菌S798株的外膜蛋白OmpQ基因序列设计引物,通过PCR扩增技术获得OmpQ基因,测序后进行同源性分析,并将其克隆至pET-28a(+)载体,构建重组质粒pET-OmpQ,转化大肠杆菌Transetta(DE3),经IPTG诱导表达纯化目的蛋白免疫昆明小鼠制备多克隆抗体,Western blot分析其免疫原性。结果显示,表达蛋白相对分子质量大小约为36 000,且以包涵体的形式存在。间接ELISA和Western blot结果表明,表达产物具有较好的免疫原性。研究结果为支气管败血波氏杆菌外膜蛋白OmpQ的后续生物学功能研究奠定基础,并为支气管败血波氏杆菌的快速诊断提供数据支持。
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