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猪IL-2成熟蛋白在昆虫细胞中的表达及生物学活性鉴定
引用本文:陈红英,郭小参,崔保安,王彦彬,张红英,方剑玉.猪IL-2成熟蛋白在昆虫细胞中的表达及生物学活性鉴定[J].中国兽医学报,2010,30(6).
作者姓名:陈红英  郭小参  崔保安  王彦彬  张红英  方剑玉
作者单位:1. 河南农业大学,牧医工程学院,河南,郑州450002
2. 河南农业大学,牧医工程学院,河南,郑州450002;信阳市动物疫病预防控制中心,河南,信阳,464002
3. 信阳市动物疫病预防控制中心,河南,信阳,464002
基金项目:国家"十一五"科技支撑计划资助项目
摘    要:以含猪IL-2基因的重组质粒pGEM-pIL2为模板,PCR扩增猪IL-2成熟蛋白基因。将猪IL-2成熟蛋白基因定向克隆到杆状病毒转移载体pFastBac Dual中,转化含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac,经抗性及蓝白斑筛选得到含猪IL-2基因的重组质粒rBacmid-IL2,转染昆虫细胞。间接免疫荧光试验表明重组猪IL-2在Sf9昆虫细胞中获得了表达,SDS-PAGE可检测到相对分子质量为20000的重组蛋白,Western-blot证实该重组蛋白可与兔抗猪IL-2单克隆抗体发生特异性反应,重组猪IL-2经纯化后能明显促进猪T淋巴细胞转化。结果表明,重组猪IL-2在昆虫细胞中得到表达,表达的重组蛋白具有一定生物学活性,为进一步开发研制新型免疫佐剂奠定了基础。

关 键 词:猪白细胞介素-2  昆虫细胞  表达  生物学活性

Expression of porcine interleukin-2 in insect cells and identification of bioactivity of its expressed protein
CHEN Hong-ying,GUO Xiao-can,CUI Bao-an,WANG Yan-bin,ZHANG Hong-ying,FANG Jian-yu.Expression of porcine interleukin-2 in insect cells and identification of bioactivity of its expressed protein[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2010,30(6).
Authors:CHEN Hong-ying  GUO Xiao-can  CUI Bao-an  WANG Yan-bin  ZHANG Hong-ying  FANG Jian-yu
Abstract:
Keywords:
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