| 过表达Fad24使猪DFAT细胞在成脂诱导条件下转向成骨分化 |
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| 引用本文： | 袁婷婷,徐海翔,徐琨,何西建,宋学雄.过表达Fad24使猪DFAT细胞在成脂诱导条件下转向成骨分化[J].中国兽医学报,2023(12):2576-2582. |
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| 作者姓名： | 袁婷婷 徐海翔 徐琨 何西建 宋学雄 |
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| 作者单位： | 1. 青岛农业大学动物医学院动物干细胞与胚胎工程研究室;2. 莒南县畜牧局 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(31672506,31372392)； |
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| 摘 要： | 旨在探索过表达Fad24基因对猪DFAT细胞诱导成脂分化的影响。根据猪Fad24基因序列设计引物，克隆猪Fad24基因的全长CDS区片段，构建猪Fad24过表达载体，通过测序比对碱基和氨基酸序列，通过脂质体瞬时转染技术，将过表达Fad24载体转染猪DFAT细胞，从mRNA水平验证了Fad24基因在猪DFAT细胞中的过表达水平，然后将过表达Fad24的猪DFAT细胞在体外诱导成脂分化，从形态学、Fad24、成脂和成骨分化核心转录因子表达水平上进行了检测。结果表明，猪Fad24过表达载体碱基序列一致性高达99.8%,氨基酸序列一致性高达100%;过表达Fad24的猪DFAT细胞Fad24的表达量高出正常猪DFAT细胞表达量约45倍；成脂分化诱导5 d时，与对照组的正常分化比较，过表达Fad24的猪DFAT细胞成脂分化完全被抑制，相反强力转向成骨分化，细胞积聚成许多小结节，诱导7 d时已形成典型的成骨样大结节，表面可见细胞分泌物；经茜素红染色鉴定，证实细胞分泌物中含有矿化物质沉淀；经Real-time PCR检测，证实过表达Fad24试验组显著下调成脂分化核心转录因子PPARγ2、SREBP...
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| 关 键 词： | 过表达Fad24 DFAT细胞 成脂 成骨 分化 猪 |
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