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猪繁殖与呼吸综合征病毒河北地方株GF1107株ORF7基因的克隆与表达
引用本文:李鹏,郑其升,李斐,周斌,曹瑞兵,陈溥言.猪繁殖与呼吸综合征病毒河北地方株GF1107株ORF7基因的克隆与表达[J].中国兽医学报,2006,26(5):468-470.
作者姓名:李鹏  郑其升  李斐  周斌  曹瑞兵  陈溥言
作者单位:1. 南京农业大学,动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏,南京,210095;河北省畜牧兽医站,河北,保定,071000
2. 南京农业大学,动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏,南京,210095
摘    要:根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ATCC VR2332株的核衣壳蛋白基因的核苷酸序列,设计并合成1对特异性引物。应用RT-PCR方法扩增PRRSV GF 1107株(GenBank登陆号:AY684124)的ORF7片段。将扩增片段克隆入pMD18-T载体中获得含有相应片段的重组质粒pMDHB-ORF7。对质粒中的插入片段进行测序,应用DNAstar序列分析软件对所测序列与GenBank中PRRSV毒株进行同源性比较。将0RF7基因克隆入原核表达载体pET-32a(+)中,在IPTG的诱导下成功获得表达,经Western blotting分析表明。表达蛋白能够与PRRSV的阳性血清发生特异性反应,为PRRSV新型诊断试剂的研究奠定了基础。

关 键 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒  ORF7基因  克隆  原核表达
文章编号:1005-4545(2006)05-0468-03
收稿时间:2005-01-14
修稿时间:2005年1月14日

Cloning and Expression in E.coli for ORF7 Gene of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Isolated in Hebei Province
LI Peng,ZHENG Qi-sheng,LI Fei,ZHOU Bin,CAO Rui-bing,CHEN Pu-yan.Cloning and Expression in E.coli for ORF7 Gene of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Isolated in Hebei Province[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2006,26(5):468-470.
Authors:LI Peng  ZHENG Qi-sheng  LI Fei  ZHOU Bin  CAO Rui-bing  CHEN Pu-yan
Institution:1. Key Laboratory of Animal Disease Diagnosis and Immunology,Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095,China;2. Animal Husbandry and Veterinary Station of Hebei Province, Baoding , Hebei 071000,China
Abstract:
Keywords:porcine reproductive and respiratory syndrome virus  ORF7 gene  cloning  prokaryotic expression
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